熒光抗體直接染色是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師考試可能涉及到的知識(shí)點(diǎn),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了相關(guān)知識(shí)點(diǎn),供考生參考。
1.染色:切片經(jīng)固定后,滴加經(jīng)稀釋至染色效價(jià)如1:8或1:16的熒光抗體(如兔抗人γ-球蛋白熒光抗體或兔抗人IgG或IgA熒光抗體等),在室溫或37℃染色30min,切片置入能保持潮濕的染色盒內(nèi),防止干燥。
2.洗片:傾去存留的熒光抗體,將切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗兩次,攪拌,每次5min,再用蒸餾水洗1min,除去鹽結(jié)晶。
3.用50%緩沖(0.5mol/L碳酸鹽緩沖液pH9.0~9.5)甘油封固醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理、鏡檢
4.對(duì)照染色
①正常免熒光血清染色,如上法處理切片,結(jié)果應(yīng)為陰性。②染色抑制試驗(yàn)(一步法):將熒光抗體和未標(biāo)記的抗體球蛋白或血清(相同)等量混合,如上法處理切片。結(jié)果應(yīng)為陰性。為證明此種染色抑制不是由于熒光抗體被稀釋所致,可用鹽水代替未標(biāo)記抗血清,染色結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性。此法結(jié)果較二步法穩(wěn)定。③類屬抗原染色試驗(yàn),前面已作敘述。
直接法比較簡(jiǎn)單,適合做細(xì)菌、螺旋體、原蟲、真菌及濃度較高的蛋白質(zhì)抗原如腎、皮膚的檢查和研究。此法每種熒光抗體只能檢查一種相應(yīng)的抗原,特異性高而敏感性較低。
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