生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)的標(biāo)記注意事項(xiàng)
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1.應(yīng)根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標(biāo)記基團(tuán)的種類(氨基、醛基或巰基)以及分子的理化性質(zhì)(酸性、中性或堿性),選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件。
2.標(biāo)記反應(yīng)時(shí),活化生物素與待標(biāo)記抗原或抗體應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤?,使每個(gè)蛋白質(zhì)分子上標(biāo)記的生物素分子數(shù)量控制在一定范圍,以免影響標(biāo)記物的活性。
3.為減少生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)后,大分子物質(zhì)造成的空間位阻影響,有利于生物素與親和素的結(jié)合,可在生物素與被標(biāo)記物間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu)。
4.生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后,不影響后者的免疫活性;標(biāo)記酶時(shí)則結(jié)果有不同。
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