分離細(xì)胞的保存及活力測定是什么?
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1.短期保存技術(shù):將分離的細(xì)胞用適量含10%~20%滅活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMI1640或其他培養(yǎng)液稀釋重懸。短期保存可置于4℃保存。
2.長期保存技術(shù):液氮深低溫(-196℃)環(huán)境保存細(xì)胞,加入二甲亞砜作為保護(hù)劑。
活力測定最簡便常用的為臺(tái)盼藍(lán)染色法。這是一種陰離子型染料,不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色,但死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加,可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色,通過死亡細(xì)胞與活細(xì)胞的百分比可反映細(xì)胞活力。
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