交叉免疫電泳是什么?免疫固定電泳是什么?
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交叉免疫電泳
用瓊脂糖作支持物,先將抗原經(jīng)電泳展開,然后在同一玻板上澆注含抗體的瓊脂糖凝膠,在后一個(gè)凝膠中進(jìn)行第二次電泳(與第一次電泳方向垂直)。這種方法實(shí)際上是在凝膠電泳后進(jìn)行免疫電擴(kuò)散。不同抗原形成互相獨(dú)立的峰狀免疫沉淀,至最適抗原/抗體比值處停止運(yùn)動(dòng),沉淀峰的高度和面積與抗原量成比例關(guān)系。用此法可進(jìn)行各種抗原的定量測(cè)定。
免疫固定電泳
免疫固定電泳是一種包括瓊脂凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個(gè)過程的操作。血清IFE可檢測(cè)IgG、IgM、IgA等及κ輕鏈、λ輕鏈。原理是將樣本在瓊脂平板上作區(qū)帶電泳,分離后其上覆蓋抗血清濾紙,濾紙分別含抗κ輕鏈、抗λ輕鏈,或抗各類重鏈抗血清,當(dāng)抗體與某區(qū)帶中的單克隆Ig結(jié)合,可形成免疫復(fù)合物沉淀,即固定,再通過漂洗與染色,呈現(xiàn)濃而窄的著色區(qū)帶,即可判別單Ig的輕鏈和重鏈的類別。血清樣本要求使用免疫項(xiàng)目藍(lán)色管采集靜脈血,避免溶血。
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