陽性雜交瘤細胞怎么樣進行克隆化培養(yǎng)與凍存?
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單個細胞培養(yǎng)又稱克隆化。細胞克隆化一般至少進行3~5次??寺』幸韵聨追N方法:
(一)熒光激活細胞分選儀 先進、高效、高純度、昂貴。
(二)有限稀釋法 操作簡單,出現(xiàn)率高,為實驗室最常用的方法。
(三)顯微操作法 直觀可靠,但操作時間過長,容易增加污染機會。
(四)軟瓊脂平板法 本法缺點是瓊脂融化溫度較難掌握,過高會導致細胞死亡,過低使細胞分布不均勻,操作較復雜,克隆出現(xiàn)率不穩(wěn)定。
雜交瘤細胞應及時凍存,以保證細胞不會因污染或過多傳代變異丟失染色體而喪失功能。目前均采用液氮保存細胞。(注意逐步降溫、快速復溫)
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