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間接凝集反應(yīng)是將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在適宜電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象。

一、間接凝集反應(yīng)的類型

(一)正向間接凝集反應(yīng) 

可溶性抗原致敏載體，用以檢測標(biāo)本中待測抗體的凝集反應(yīng)，稱為正向間接凝集反應(yīng)。

(二)反向間接凝集反應(yīng) 

特異性抗體致敏載體，用以檢測標(biāo)本中待測抗原的凝集反應(yīng)，稱為反向間接凝集反應(yīng)。

(三)間接凝集抑制反應(yīng) 

先將可溶性抗原(或抗體)與相應(yīng)的抗體(或抗原)混合，然后再加入抗原(或抗體)致敏的載體顆粒，若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，則說明標(biāo)本中不存在相同抗原，抗體試劑未被結(jié)合。

若存在相同抗原，抗體與之結(jié)合，凝集反應(yīng)被抑制，稱為正向(或反向)間接凝集抑制試驗(yàn)。間接血凝抑制試驗(yàn)可用于檢測抗體也可測定抗原。

(四)協(xié)同凝集反應(yīng) 

協(xié)同凝集反應(yīng)與間接凝集反應(yīng)的原理相類似，但所用載體為金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)。

SPA具有與IgG的Fc段結(jié)合的特性，因此當(dāng)這種葡萄球菌與IgG抗體連接時(shí)，就成為抗體致敏的顆粒載體。如與相應(yīng)抗原接觸，即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。協(xié)同凝集反應(yīng)也適用于細(xì)菌病毒的直接檢測。

二、間接血凝試驗(yàn)

(一)原理：抗原(或抗體)包被于紅細(xì)胞表面，成為致敏載體，然后與相應(yīng)的抗體(或抗原)結(jié)合，從而使紅細(xì)胞被動(dòng)的凝聚在一起，出現(xiàn)可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。

(二)載體：最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細(xì)胞及O型人紅細(xì)胞。

致敏的新鮮紅細(xì)胞只能使用2～3天。因此在致敏前先將紅細(xì)胞醛化，可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細(xì)胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。

(三)致敏：致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。

(四)血凝試驗(yàn)：可在微量滴定板或試管中進(jìn)行，將標(biāo)本倍比稀釋，一般為1:64。凡紅細(xì)胞沉積于孔底，集中呈一圓點(diǎn)的為不凝集(-)。如紅細(xì)胞凝集，則分布于孔底周圍。以++凝集(紅細(xì)胞沉積于管底呈環(huán)狀，四周有凝集的小塊)的孔為滴度終點(diǎn)。

三、膠乳凝集試驗(yàn)

是一種間接凝集試驗(yàn)，載體為聚苯乙烯膠乳，帶有負(fù)電荷，可物理性吸附蛋白分子，但這種結(jié)合牢固性差。

膠乳凝集試驗(yàn)分試管法和玻片法兩種。

四、明膠凝集試驗(yàn)

是一種間接凝集試驗(yàn)，將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅色明膠顆粒上，當(dāng)致敏顆粒與樣品血清作用時(shí)，若血清含有抗病毒抗體則可形成肉眼可見的粉紅色凝集。

該方法應(yīng)用于HIV-1抗體和抗精子抗體檢測等。

五、間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用

(一)抗原的檢測 

反向間接凝集試驗(yàn)用于檢測病原體可溶性抗原，也可用于檢測各種蛋白質(zhì)成分。

(二)抗體的檢測 

可用于檢測細(xì)菌、病毒和寄生蟲等感染后產(chǎn)生的抗體，例如間接凝集試驗(yàn)或明膠顆粒凝集試驗(yàn)用于檢測抗人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體以診斷艾滋病、膠乳凝集試驗(yàn)用于檢測抗溶血素等。

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