酶測定中底物濃度的影響有哪些呢？快來跟著小編了解一下吧！

在檢測試劑中底物濃度、輔因子、活化劑、復(fù)構(gòu)劑的種類和濃度均對酶的測定至關(guān)重要。其中以底物的種類和濃度最為重要。

底物濃度影響遵循米氏方程：

ν＝V[S]/K_m＋[S]

當(dāng)?shù)孜餄舛冗h(yuǎn)遠(yuǎn)小于K_m，增加底物濃度，反應(yīng)速度增加。

當(dāng)?shù)孜颷S]＞＞K_m時，公式近似為ν=V，反應(yīng)速度不再增加，故此時反應(yīng)速度為最大反應(yīng)V。

從理論上說只有測定的是酶最大反應(yīng)V，反應(yīng)速度才和酶量成正比。

（1）底物的種類

若所測的酶專一性不強(qiáng)，可作用于多種底物，K_m最小的底物往往是此酶的生理底物。（K_m表示酶和底物的親和力，K_m越小親和力越大）

如該酶測定主要用于臨床診斷工作，首先應(yīng)考慮有效診斷價值的底物。

選擇K_m小的底物測定酶活性，在最大反應(yīng)速度時底物濃度也將最低。這意味著試劑成本可能較低，不易出現(xiàn)底物難溶解的困難。

（2）選擇底物的合適濃度

確定底物種類后，重要的是選擇底物的合適濃度。

米氏方程在選擇酶測定底物濃度有著重要的指導(dǎo)作用。

計算出某一酶的K_m后就可以計算出不同底物濃度和K_m間的比值，將其代入米氏方程就可以計算出此時酶促反應(yīng)速度相當(dāng)于最大反應(yīng)速度的百分比。

上述只能適應(yīng)用于單一底物的酶。

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