影響化學(xué)標(biāo)記因素
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1. 發(fā)光劑的選擇。
2. 被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì):選用較高的純度和免疫學(xué)穩(wěn)定性的抗原進(jìn)行標(biāo)記;抗體作為被標(biāo)記物時,則要求具有較高的效價,應(yīng)用提純的IgG來代替全血清。
3. 選擇正確的標(biāo)記方法。
4. 原料比:IgG:發(fā)光劑:交聯(lián)劑的克分子比(mol:mol:mol)會影響結(jié)合物的發(fā)光效率。
5. 標(biāo)記率:結(jié)合物中IgG與發(fā)光劑之間的克分子比。
6. 溫度:盡量選擇較低的溫度,以避免蛋白質(zhì)在標(biāo)記過程中活性的喪失。
7. 純化與保存:通過透析法、凝膠過濾法和鹽析沉淀法等進(jìn)行純化。結(jié)合物一般可分裝保存在-70℃條件下,最好冷凍干燥保存。
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