放射免疫分析的實驗方法及測定，快來跟著小編了解一下吧！

（一）抗原抗體反應：將未標記抗原（標準品和待測樣品）、標記抗原和特異性抗體加入反應試管中，在一定條件（溫度、時間及介質(zhì)pH）下進行競爭抑制反應。

先加待測樣品（或標準品）和抗血清，使非標記抗原與抗體達到結合平衡，然后再加入標記抗原競爭與抗體結合。

（二）分離結合與游離標記物：RIA反應平衡后，標記抗原與試劑抗體形成免疫復合物（B）。由于其含量極少，不能自行沉淀，需加入適當?shù)某恋韯⑵鋸氐壮恋恚缓蠼?jīng)離心使其與游離的標記抗原（F）分離。某些小分子抗原，也可采用吸附法分離B與F。

理想的分離方法應分離徹底、迅速；分離試劑和過程不影響反應平衡，而且效果不受反應介質(zhì)因素的影響；操作應簡單、重復性好以及經(jīng)濟。方法：

1.第二抗體沉淀法：反應完成后加入二抗形成復合沉淀。為增強效果可加入一定量的與一抗同種動物的血清或IgG，或是將二抗與某些顆粒固相物連接。

2.聚乙二醇（PEG）沉淀法：能非特異地沉淀抗原抗體復合物等大分子蛋白質(zhì)，而不沉淀小分子抗原。當溫度髙于30℃時，沉淀物易復溶。

3.PR試劑法 先將二抗與PEG按一定比例混合成懸液后進行試驗。此法保留了二者的優(yōu)點，節(jié)省了二者的用量，且分離迅速，簡便。

4.活性炭吸附法：活性炭可吸附小分子游離抗原或半抗原，而大分子蛋白（如抗體和免疫復合物）則留在溶液中。

（三）放射性測量及數(shù)據(jù)處理

分離B、F后，可分別對二者進行測定。

繪制標準曲線（劑量-反應曲線），樣品管以其測量或計算的反應參數(shù)，通過標準曲線即可查出相應的待檢抗原濃度。

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