發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)總結(jié)，跟著小編來學(xué)習(xí)一下吧！

（一）常用標(biāo)記方法　小分子物質(zhì)（如藥物、激素等）的標(biāo)記主要是通過偶聯(lián)反應(yīng)制備（直接偶聯(lián)）；生物大分子的標(biāo)記是利用交聯(lián)劑使標(biāo)記物與被標(biāo)記物分子結(jié)構(gòu)中游離的氨基、硫氫基、羥基等基團(tuán)形成不可逆的連接（間接偶聯(lián)）。

常見有：碳二亞胺縮合法；過碘酸鈉氧化法；重氮鹽偶聯(lián)法；N-羥基琥珀酰亞胺活化法。

（二）影響標(biāo)記的因素

1.發(fā)光劑的選擇。

2.被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì)：選用較高的純度和免疫學(xué)穩(wěn)定性的抗原進(jìn)行標(biāo)記；抗體作為被標(biāo)記物時，則要求具有較高的效價，應(yīng)用提純的IgG來代替全血清。

3.選擇正確的標(biāo)記方法。

4.原料比：IgG：發(fā)光劑：交聯(lián)劑的克分子比（mol: 第十一章　生物素-親和素放大技術(shù)mol:mol）會影響結(jié)合物的發(fā)光效率。

5.標(biāo)記率：結(jié)合物中IgG與發(fā)光劑之間的克分子比。

6.溫度：盡量選擇較低的溫度，以避免蛋白質(zhì)在標(biāo)記過程中活性的喪失。

7.純化與保存：通過透析法、凝膠過濾法和鹽析沉淀法等進(jìn)行純化。結(jié)合物一般可分裝保存在-70℃條件下，最好冷凍干燥保存。

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