生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)的標(biāo)記方法和注意事項(xiàng)，跟著小編來(lái)學(xué)習(xí)一下吧！

標(biāo)記方法

1.標(biāo)記抗體、抗原：由于一個(gè)抗體分子可連接多個(gè)生物素分子，因此一個(gè)生物素化的抗體分子在反應(yīng)時(shí)可與多個(gè)親和素分子結(jié)合。通常選用第二抗體進(jìn)行生物素標(biāo)記，制備的標(biāo)記物具有通用性。

2.標(biāo)記酶：如生物素標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶（HRP）。

標(biāo)記注意事項(xiàng)

1.應(yīng)根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標(biāo)記基團(tuán)的種類(lèi)（氨基、醛基或巰基）以及分子的理化性質(zhì)（酸性、中性或堿性），選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件。

2.標(biāo)記反應(yīng)時(shí)，活化生物素與待標(biāo)記抗原或抗體應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤姑總€(gè)蛋白質(zhì)分子上標(biāo)記的生物素分子數(shù)量控制在一定范圍，以免影響標(biāo)記物的活性。

3.為減少生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)后，大分子物質(zhì)造成的空間位阻影響，有利于生物素與親和素的結(jié)合，可在生物素與被標(biāo)記物間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu)。

4.生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后，不影響后者的免疫活性；標(biāo)記酶時(shí)則結(jié)果有不同。

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