T細(xì)胞功能檢測(cè)原理是什么呢
T細(xì)胞功能檢測(cè)原理是什么呢?為了幫助更多考生了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家搜集整理如下:
(一)T細(xì)胞增殖試驗(yàn)
1.原理:T細(xì)胞在體外受到有絲分裂原或抗原的刺激后,細(xì)胞增殖,并轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。因此,淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)又稱淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。
2.刺激物:植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)和美洲商陸(PWM)、白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、純化蛋白衍生物(PPD)和白色念珠菌等。
3.方法學(xué):檢測(cè)T細(xì)胞增殖反應(yīng)的方法有:
(1)形態(tài)學(xué)檢查法:運(yùn)用普通光學(xué)顯微鏡,簡(jiǎn)便易行。缺點(diǎn)是依靠肉眼觀察形態(tài)學(xué)變化,判斷結(jié)果易受主觀因素影響,重復(fù)性和準(zhǔn)確性較差。
(2)3H-TdR摻入法:敏感性高,客觀性強(qiáng),重復(fù)性好,但需一定設(shè)備條件,及存在放射性核素污染問(wèn)題。
(3)MTT比色法:本方法的敏感性雖不及3H-TdR摻入法,但操作簡(jiǎn)便,無(wú)放射性污染。較常采用。
(二)T細(xì)胞分泌功能測(cè)定
通過(guò)對(duì)于T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的含量、生物學(xué)活性和基因表達(dá)水平,以反映T細(xì)胞功能。
(三)T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)
常選用可傳代的已建株的人腫瘤細(xì)胞,與待檢淋巴細(xì)胞混合,觀察腫瘤細(xì)胞殺傷的情況。是評(píng)價(jià)機(jī)體細(xì)胞免疫水平的常用指標(biāo),特別是測(cè)定腫瘤患者CTL殺傷腫瘤細(xì)胞的能力,常作為判斷預(yù)后和觀察療效的指標(biāo)之一。
(四)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
1.特異性抗原皮膚試驗(yàn):常用結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)。其他皮試抗原還有白色念珠菌素、皮膚毛癬菌素、腮腺炎病毒等。若受試者從未接觸過(guò)該抗原,則不會(huì)出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng),因此陰性者也不一定表明細(xì)胞免疫功能低下。往往需用兩種以上抗原進(jìn)行皮試。
2.PHA皮膚試驗(yàn):將定量PHA注射到受試者前臂皮內(nèi),可非特異性刺激T細(xì)胞發(fā)生母細(xì)胞轉(zhuǎn)化,呈現(xiàn)以單個(gè)核細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎性反應(yīng)。PHA皮膚試驗(yàn)敏感性高,比較安全可靠,臨床常用于檢測(cè)機(jī)體的細(xì)胞免疫水平。
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