免疫測(cè)定——流式細(xì)胞分析法，主要用于那種情況的檢驗(yàn)?zāi)?？快?lái)跟著小編了解一下吧！

主要用于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子和細(xì)胞表面黏附分子的檢測(cè)，通過(guò)特異性的熒光抗體染色，能簡(jiǎn)單、快速地進(jìn)行檢測(cè)，精確判斷不同細(xì)胞亞群的細(xì)胞因子和膜分子的表達(dá)情況。根據(jù)熒光抗體的性質(zhì)，熒光抗體染色分直接法和間接法。直接法較為常用，其敏感性雖不及間接法，但特異性強(qiáng)。

可區(qū)分具有不同分泌特性的細(xì)胞亞群，如Th1、Th2細(xì)胞等。

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子時(shí)，主要包括以下基本步驟：

1.分離和培養(yǎng)待檢細(xì)胞。

2.細(xì)胞固定：常用的細(xì)胞固定劑為4%多聚甲醛。

3.封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)：即用含5%脫脂奶粉和鈣、鎂離子的PBS溶液，重懸已固定的細(xì)胞。

4.染色與分析：即用熒光素標(biāo)記的細(xì)胞因子特異性單克隆抗體做熒光抗體染色，用流式細(xì)胞儀分析熒光陽(yáng)性細(xì)胞百分比和熒光強(qiáng)度。此外，若應(yīng)用不同熒光素標(biāo)記兩種以上細(xì)胞因子的單克隆抗體，則可同時(shí)檢測(cè)同一細(xì)胞內(nèi)2種以上不同的細(xì)胞因子。

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