免疫細胞的分離:
一、外周血單個核細胞的分離
外周血中單個核細胞(淋巴細胞和單核細胞)的比重與紅細胞、多核白細胞及血小板不同,介于1.075~1.090之間,紅細胞及粒細胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之間,因而可利用一種比重介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細胞按相應密度梯度分布而加以分離醫(yī)`學教育網搜集整理。
以上可見,分離介質是分離各類細胞的關鍵,對分離介質的基本要求是:①對細胞無毒;②基本等滲;③不溶于血漿及分離物質;④有特定的比重。將2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液與1份34%泛影葡胺生理鹽水溶液混合,其比重為1.077±0.002,可作為常規(guī)的淋巴細胞分離液,即Ficoll分離液。主要用于分離外周血中單個核細胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層、單個核細胞層、粒細胞層和紅細胞層。
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