抗血清特性鑒定:
根據(jù)不同目的制備的抗血清,對其中所含抗體的濃度,特異性及免疫球蛋白種類的要求也不一樣。為了獲得質(zhì)量和數(shù)量上合符要求的抗血清,在收集動物血清前必須對免疫效果進行檢測,對收獲后的抗血清也必須對—些參數(shù)進行分析,如效價、親和力及交叉反應等。根據(jù)不同的抗原性質(zhì)選用合適的檢測方法。最常用的為免疫沉淀,ELISA,放射免疫等。
效價又稱滴度(titer),是常用于表達抗血清中特異性抗體相對含量的—個半定量指標,即在給定的條件下,結(jié)合—定量抗原的抗血清的稀釋度??寡褰?jīng)一系列稀釋后(如倍比稀釋)與定量的抗原反應,以能檢測抗血清最大稀釋倍數(shù)即為該抗血清的效價。不同的檢測方法測定同一種抗血清的效價醫(yī)學/教育/網(wǎng)編輯整理,靈敏度不一樣,抗血清的效價也不一樣,如沉淀反應(瓊脂雙擴散)與ELISA二者的效價相差甚大,后者遠高于前者。放射免疫分析(RIA)常用于標記小分子抗原來檢測抗血清的效價。
親和力(affinity)表示抗血清與相應抗原的結(jié)合強度,是描述抗體持異性的重要指標,
常用親和常數(shù)K表示。親和常數(shù)K與抗原抗體反應的平衡常數(shù)有關(guān)。
抗體特異性與交叉反應:抗體是特異的。只與相應抗原反應。實際制備的抗體卻常有非特異性反應,這是因為抗原不純造成的。多組分抗原之間存在共同的抗原決定簇,或者兩個抗原決定簇結(jié)構(gòu)類似能與同一抗體結(jié)合,均可出現(xiàn)抗體與異源抗原的交叉反應。用瓊脂雙擴散能簡便直觀地反映不同抗原與同一抗血清,或不同抗血清與同一抗原的交叉反應。
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