免疫球蛋白的分離提純原理：

目的

有利標記；減少非特異反應(yīng)；有利Ig定量。

分離提純方法（原理）：

一般選用2～3種，或同一方法反復(fù)進行2～3次醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。

鹽析法：在不同濃度的中性鹽中蛋白質(zhì)會脫水，降低帶電電勢，親水性變?yōu)槭杷裕肿娱g相互凝聚而沉淀（鹽析作用）。不同蛋白質(zhì)鹽析所需中性鹽的濃度不同，故可分離不同蛋白質(zhì)。常用中性鹽：硫酸銨分析純試劑。

離子交換層析法：利用不同的蛋白質(zhì)在緩沖溶液中所帶電荷不同，與某一載體上的具有相反電荷的離子基團進行吸附，然后進行解脫，達到純化蛋白質(zhì)目的。常用載體：纖維素DEAE，帶正電，吸附帶負電的Alb、α、β球蛋白。

凝膠過濾法：凝膠顆粒是網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，當(dāng)分子大小不同的混合物通過凝膠柱時，分子大的先下來，分子小的嵌入凝膠顆粒的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中后下來，從而將分子大小不同的物質(zhì)分離開來，即為分子篩的作用。常用凝膠：葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠，分離Ig多用G150。

親和層析法：利用抗原抗體的結(jié)合具有特異性、可逆性，將純化抗原先交聯(lián)到載體（瓊脂糖珠）上，制成親和層析柱，當(dāng)Ab（Ig）通過時，與抗原特異性結(jié)合在柱上，Ab中雜質(zhì)流出。然后通過改變緩沖液 pH、離子強度，使Ab解脫下來。