用熒光素、同位素或酶標(biāo)記抗體或抗原,用于抗原或抗體檢測是目前廣泛應(yīng)用的敏感、可靠的方法。上述三種常用的標(biāo)記物與抗原或抗體化學(xué)連接之后不改變后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位檢測。
1.免疫熒光技術(shù) 免疫熒光技術(shù)(immunofluorescence techni)是用化學(xué)方法使熒光素標(biāo)記的抗體(或抗原)與組織或細胞中的相應(yīng)抗原(或抗體)結(jié)合,進行定性定位檢查抗原或抗體的方法。
2.放射免疫分析法 放射免疫分析法(radioimmunoassay RIA)應(yīng)用競爭性結(jié)合的原理,應(yīng)作放射性同素標(biāo)記抗原(或抗體)與相應(yīng)抗體(或抗原)結(jié)合,通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果,本方法可進行超微量分析,敏感性高,可用于測定抗原、抗體、抗原抗體復(fù)合物。醫(yī)'學(xué)教育網(wǎng)搜集整理本法常用的同位素有125Ⅰ和131Ⅰ。
3.酶聯(lián)免疫分析法 酶聯(lián)免疫分析法(enzyme immunoassay,EIA)是當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的免疫檢測方法。本法將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶對底物高效催化作用結(jié)合起來,根據(jù)酶作用底物后顯色,以顏色變化判斷試驗結(jié)果,可經(jīng)酶標(biāo)測定儀作定量分析,敏感度可達ng水平。常用于標(biāo)記的酶有辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase)、堿性磷酶(alkaline phosphatase)等。它們與抗體結(jié)合不影響抗體活性。這些酶具有一定的穩(wěn)定性,制成酶標(biāo)抗體可保存較長時間。目前常用的方法有酶標(biāo)免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附法。前者測定細胞表面抗原或組織內(nèi)的抗原;后者主要測定可溶性抗原或抗體。本法既沒有放射性污染又不需昂貴的測試儀器,所以較放射免疫分析法更易推廣。
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