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    胸腺蛋白口服溶液鑒別

    2012-07-27 11:26 醫(yī)學教育網(wǎng)
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    1.取本品2ml,置具塞試管中,加雙縮脲試液(取硫酸銅0.15g,酒石酸鉀鈉0.6g,溶于50ml水中,攪拌下加入10%氫氧化鈉溶液30ml,用水稀釋至100ml)8-10滴,混勻,即顯紫堇色。

    2.取本品12ml,加三氯乙酸1.8g,12000rpm離心10分鐘,棄上清液,沉淀用無水乙醇2ml洗滌二次,每次12000rpm離心10分鐘,揮干乙醇,殘渣加0.1mol/L氫氧化鈉溶液100μl溶解,加樣品緩沖液(取濃縮膠緩沖液1.2ml、甘油1.0ml、10%十二烷基硫酸鈉溶液2.0ml、0.5%溴酚藍溶液0.5ml、β-巰基乙醇0.5ml、水4.8ml,混勻)100μl。另取標準蛋白(分子量范圍14,400-97,400),用SDS還原樣品緩沖液(取β-巰基乙醇25μl,加樣品緩沖液475μl)以1:20稀釋標準蛋白作對照,將處理好的標準蛋白和樣品置水浴中5分鐘,放冷后上樣。照電泳法(中國藥典2000年版二部附錄V F第五法)測定,供試品在12KD-55KD分子量范圍內(nèi)應(yīng)有明顯電泳帶。

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