1.研究犀黃丸對人乳腺癌細胞株MDA-MB-231、人肝癌細胞株SMMC7721、人膀胱癌細胞株T24、人早幼粒細胞白血病細胞株HL-60、人肺腺癌A549細胞株細胞增殖的影響 方法:將不同濃度犀黃丸浸出液,直接加入含腫瘤細胞培養(yǎng)板中,MTT法分別測定其對多種惡性腫瘤細胞株增殖的影響。結(jié)果:犀黃丸浸出液對MDA-MB-231、SMMC7721、T24、HL-60、A549腫瘤細胞的增殖均有明顯的抑制作用(P<0.05;P<0.01),且隨濃度的增加,抑制率上升,呈劑量依賴關(guān)系,抑瘤作用的IC50以MDA-MB-231、SMMC7721為敏感。結(jié)論:體外實驗結(jié)果表明,犀黃丸對多種人腫瘤細胞增殖有明顯抑制作用,不同的惡性腫瘤細胞株對其的敏感性存在較大的差異,其抑瘤作用表現(xiàn)出一定的選擇性。提示犀黃丸在傳統(tǒng)上用于“乳巖”———乳腺癌的治療確有一定的科學(xué)性,故傳統(tǒng)抗腫瘤中藥在現(xiàn)代臨床使用時也應(yīng)選擇敏感的腫瘤類型。

2. 犀黃丸抗腫瘤的試驗研究

2.1體外實驗

2．1.1對肝癌細胞的作用 熊氏等采用四唑鹽比色法(MTT)檢測復(fù)方犀黃丸對人肝癌細胞(Be1一7402)的抑制率，結(jié)果達39%。10%、15%、20%含藥血清組對癌細胞的生長抑制率高于對照組及2．5%、5%組(P<0．05)，其血清濃度與抑制率呈直線、相關(guān)。提示復(fù)方犀黃丸對肝癌細胞體外生長有一定的抑制作用。另用流式細胞儀分析細胞周期時相分布，顯示含藥血清處理24 h，S期細胞比例增加，G2-M期細胞減少；處理48 h后，G0/1期細胞增多，S期細胞減少(P<0．01)。提示復(fù)方犀黃丸含藥血清可干擾人肝癌細胞系細胞周期。熊氏等用犀黃丸含藥血清作用于Bel-7402，觀察到細胞體積縮小，部分細胞核破裂，呈現(xiàn)大小不等、形態(tài)不規(guī)則的熒光染色碎片或梅花狀核型。染色質(zhì)固縮，并凝結(jié)成塊，聚集在核膜周邊，呈新月狀或腎狀，且凋亡細胞數(shù)量隨含藥血清的濃度增加和作用時間延長而增多。李氏等在用不同濃度犀黃丸含藥血清作用Bel一7402不同時間后，發(fā)現(xiàn)其殺傷率最高達75%，顯著高于對照組(P<0．O1)。用SASB法檢測Be1一7402細胞的Bc1一2、C-myc基因蛋白表達降低，p53基因蛋白表達增強。李氏等用流式細胞儀檢測犀黃丸(含藥血清)誘導(dǎo)Be1一7402凋亡過程中發(fā)現(xiàn)，DNA瓊脂糖凝膠電泳法顯示有明顯的DNA梯帶，同時細胞內(nèi)游離鈣離子濃度明顯升高，以凋亡早期明顯，可能是誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡的機制之一。

金氏等研究發(fā)現(xiàn)，犀黃丸浸提液(100、2009L/mL)可顯著降低肝癌細胞S}VNC7721分泌的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)水平(P<0．05，P<0．O1)，且抑制作用有一定的劑量依賴性。5 d時其浸提液2009L/mL比對照組顯著降低SMMC7721分泌的親基質(zhì)金屬蛋白酶9、基質(zhì)金屬蛋白酶9、親基質(zhì)金屬蛋白酶2活性(P<0．05，P<0．O1)；7 d時更為明顯，2種濃度均顯著降低其活性(尸<0．05，尸<0．O1)，且有一定的劑量依賴性。金氏等用流式細胞術(shù)測定2種濃度西黃丸，SMMC7721中Go-G1期細胞比例顯著低于對照組(尸<0．O1)，2009L/mL使G：一M期增多(P<0．O1)，表明犀黃丸可特異性地將腫瘤細胞阻滯在G2-M期。

2.1.2對乳腺癌細胞的作用 梁氏等用MTT法檢測10%、15%、20%犀黃丸含藥血清組對人乳腺癌細胞(MCF一7)的生長抑制，均明顯高于陰性對照組(P<0．O1)及2．5%和5%組，血清濃度與抑制率呈直線相關(guān)。流式細胞儀周期分析結(jié)果顯示，含藥血清處理24 h，S期細胞比例增加，G2一M期細胞減少：處理48 h后，G0。期細胞增多，s期細胞減少。說明犀黃丸含藥血清早期主要影響細胞進入G2-M期，后期主要使細胞停滯于G0/1期，推斷其作用機制主要表現(xiàn)在使大部分細胞停滯在DNA合成前期，導(dǎo)致癌細胞發(fā)生凋亡。金氏等用MTT法分別測定犀黃丸浸出液對MDA—MB一231、SMMC7721、T24、HL一60、A549腫瘤細胞的增殖，均有明顯的抑制作用(P<0．05，P<0．O1)，且呈劑量依賴關(guān)系，以MDA—MB一231、SMMC7721為敏感。結(jié)論：犀黃丸對多種人腫瘤細胞有明顯抑制作用，但敏感性存在較大的差異。

2．2體內(nèi)實驗

唐氏等建立s180實體瘤模型小鼠60只，隨機分為4組，并設(shè)陰性對照組。結(jié)果：聯(lián)合用藥組抑瘤率55．4%，顯著高于陰性組(P<0．05)，且高于單用犀黃丸或5一氟尿嘧啶(5 Fu)組(均P<0．05)。提示犀黃丸和5一Fu聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用。金氏等給予移植性Ul4荷瘤小鼠模型犀黃丸，流式細胞術(shù)測定細胞周期。結(jié)果：犀黃丸高劑量組中導(dǎo)致Ul4細胞Go G。期細胞比例顯著低于模型組(P<0．01)，G2-M期細胞增多(P<0．01)。顯示犀黃丸可將腫瘤細胞阻滯在G2-M期，從而發(fā)揮抑瘤效應(yīng)。

3.牛黃為脊索動物門哺乳綱?？苿游稂S牛的膽囊結(jié)石，含有膽紅素、麥角甾醇、卵磷脂、維生素D及鈣、鐵、銅等多種微量元素及丙氨酸、甘氨酸、牛黃酸、天門冬氨酸、精氨酸和蛋氨酸等氨基酸。麝香含有麝香酮、雄黃酮及多種氨基酸。乳香、沒藥均為橄欖科植物乳香樹與沒藥樹的樹脂，主要含樹脂、樹膠、揮發(fā)油。臨床藥理研究，西黃丸具有抗菌消炎，抗病毒，抗結(jié)核，鎮(zhèn)靜止痛，止血消腫，抗癌以及增強機體抗病能力的作用。對球菌、桿菌有較強的抑制和殺滅作用。故臨床多用于各種細菌和病毒引起的化膿性感染、乳腺增生性疾病、刀槍傷痛、跌打損傷。此外，單味牛黃有較好的抗驚厥、退熱作用，麝香有強烈的芳香氣味，能使心搏、呼吸加快，增加白細胞，臨床應(yīng)用麝香注射液治療頸淋巴結(jié)核有顯效，且無副作用，乳香、沒藥具有擴張外周血管，增加器官血流量，鎮(zhèn)痛抗炎作用，促進炎性腫塊吸收，提高機體免疫力。