免疫球蛋白具有抗原性，可用以免疫動(dòng)物制備相應(yīng)的抗體，而這種抗體常用于免疫球蛋白的檢測(cè)。五類免疫球蛋白皆可用前面介紹的純化方法提取出來(lái)。如將這些免疫球蛋白分解成片段，如Fc段、Fab段、輕鏈等作為免疫原制備抗血清，則可制得分辨能力更高的特異性抗體。制備方法如下：

1.溫和條件析離亞單位亞單位之間以非共價(jià)鍵、如氫鍵、靜電引力等連接起來(lái)，這些鍵結(jié)合力較弱，可經(jīng)2種方法將其斷開制備片段。第一種方法是改變pH，一般將pH調(diào)至3～4（羧基滴定范圍）和9～10（賴氨酸－酪氨酸滴定范圍），當(dāng)?shù)陀?或高于10時(shí)，亞單位會(huì)離解。這個(gè)方法是利用強(qiáng)變性劑，如8mol/L鹽酸胍等。用此可以將亞單位分開。這個(gè)方法也用于載脂蛋白抗原的解離和膠原肽的提取醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

2.二硫鍵的解離二硫鍵是連接Ig肽鏈的共價(jià)鍵，解離二硫鍵可將輕鏈與重鏈分開。解離的方法多采用氧化法和還原法。氧化法的優(yōu)點(diǎn)是切開后，肽鏈不能重新形成二硫鍵，便于肽鏈純化；缺點(diǎn)是甲硫氨酸被氧化成亞砜，色氨酸側(cè)鏈被破壞。還原法是將二硫鍵還原成巰基。但這個(gè)疏基極不穩(wěn)定，易再重新結(jié)合成二硫鍵，必須及時(shí)用碘乙酸或碘代乙酰胺進(jìn)行羧甲基化。

3.溴化氰裂解法溴化氰與蛋白質(zhì)中的甲硫氨酸側(cè)鏈的硫醚基起反應(yīng)，生成溴化亞氨內(nèi)酯。此產(chǎn)物與水反應(yīng)，將肽鏈斷裂。

4.酶裂解法因?yàn)槊附庥袠O好的專一性，不同的片段可用不同的酶裂解。如木瓜酶可將IgG裂解成Fc和Fab（×2）3個(gè)片段，胃蛋白酶可將IgG解成F（ab＇）2和幾個(gè)小肽段，胰蛋白酶則將其切成不規(guī)則的肽鏈。作為抗原制備常用木瓜酶切斷，取得Fc段，以制備抗鏈血清。作為抗體試劑應(yīng)用，常用胃蛋白酶切斷取得F（ab＇）2。