一、動(dòng)物的選擇

選擇合適的動(dòng)物進(jìn)行免疫極為重要。選擇時(shí)應(yīng)考慮以直幾個(gè)因素：

①抗原與免疫動(dòng)物的種屬差異越遠(yuǎn)越好；親緣關(guān)系太近不易產(chǎn)生抗體應(yīng)答（如兔－大鼠之間，雞－鴨之間）。

②抗血清量的需要：大動(dòng)物如馬、騾等可獲得大量血清（一頭成年馬反復(fù)采血可獲得10000ml以上的抗血清）；但有時(shí)抗體需要是不多，選用家兔或豚鼠即可。

③抗血清的要求：抗血清可分為R型和H型。H型抗血清用于沉淀反應(yīng)較難掌握，因而極少應(yīng)用。

④抗原的選擇：對(duì)蛋白質(zhì)抗原，大部分動(dòng)物皆適合常用的是山羊和家兔。但是，在某些動(dòng)物體內(nèi)有類似的物質(zhì)或其它原因，對(duì)這些動(dòng)物免疫原性極差，如IgE對(duì)綿羊、胰島素對(duì)家兔、多種酶類（如胃蛋白酶原等）對(duì)山羊等，免疫時(shí)皆不易出現(xiàn)抗體。這些物質(zhì)有時(shí)可以用豚鼠（如胰島素等）、火雞、甚至豬、狗、貓等作試驗(yàn)免疫。

⑤甾體激素免疫多用家兔；酶類免疫多用豚鼠醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。

二、免疫劑量、時(shí)間和途徑

免疫原合適劑量的選定應(yīng)考慮抗原性強(qiáng)弱、分子量大小和免疫時(shí)間。抗原需可量多，時(shí)間間隔長(zhǎng)，劑量可適當(dāng)加大。大動(dòng)物抗原劑量（以蛋白抗原為準(zhǔn)）約0.5～1mg/只，小動(dòng)物約0.1～0.6mg/只。有時(shí)主觀希望加強(qiáng)免疫效果而不適當(dāng)?shù)丶哟髣┝?，往往?huì)弄巧成拙。因?yàn)閯┝考哟髽O易造成免疫耐受（免疫抑制）而遭失敗。已有證明，幾微克的蛋白質(zhì)也能很好地免疫出抗血清。

免疫注射的途徑也很重要。一般采用多點(diǎn)注射，一只動(dòng)物注射總數(shù)約為8～10點(diǎn)，包括足掌及肘窩淋巴結(jié)周圍，背部?jī)蓚?cè)、頜下、耳后等處皮內(nèi)或皮下，皮內(nèi)易引起細(xì)胞免疫反應(yīng)，對(duì)提高抗體效價(jià)有利。但皮內(nèi)注射較困難，特別是天冷時(shí)更難注入（因佐劑加入后粘度較大）。其他途徑還有肌內(nèi)、腹腔、靜脈、腦內(nèi)等，但較少應(yīng)用。如抗原極為寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法，抗原只需10～100μg；方法是先用不完全佐劑在足作基礎(chǔ)免疫（預(yù)免疫），10～15天后可見肘窩處有腫大的淋巴結(jié)（有時(shí)在腹股溝處觸及），用兩手指固定好淋巴結(jié)，消毒后用微量注射器直接注射入抗原（一般不需要佐劑）。

免疫間隔時(shí)間也是重要因素，特別是首次與第二次之間更應(yīng)注意。第一次免疫后，因動(dòng)物機(jī)體正處于識(shí)別抗原和B細(xì)胞增殖階段，如很快接著第二次注入抗原，極易造成免疫抑制。一般以間隔10～20天為好。二次以后每次的間隔一般為7～10天，不能太長(zhǎng)，以防刺激變?nèi)酰贵w效價(jià)不高。對(duì)于半抗原的免疫間隔則要求較長(zhǎng)，有的報(bào)告1個(gè)月，有的長(zhǎng)達(dá)40～50天，這是因?yàn)榘肟乖切》肿?，難以刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)之故。免疫的總次數(shù)多，多為5～8次。如為蛋白質(zhì)抗原，第八次免疫未獲得抗體，可在30～50天后再追加免疫一次；如仍不產(chǎn)生抗體，則應(yīng)更換動(dòng)物。半抗原需經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間的免疫才能產(chǎn)生高效價(jià)抗體，有時(shí)總時(shí)間為一年以上。