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    臨床蛋白電泳基本技術(shù)-生化檢驗

    2012-10-29 17:13 來源:
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    1.醋酸纖維素薄膜電泳

    醋酸纖維素是指纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯,由該物質(zhì)制成的薄膜稱為醋酸纖維薄素薄膜。它具有電滲小、分離速度快、分離清晰、血清用量少及操作簡便等優(yōu)點,現(xiàn)已廣泛用于血清蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、脂蛋白和同工酶等的分離和測定。

    2.凝膠電泳

    凝膠電泳根據(jù)支持介質(zhì)的不同可分為淀粉膠、瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳等。瓊脂糖凝膠孔徑較大,對蛋白質(zhì)一般不起分子篩作用,適用于分離同工酶及其亞型,大分子核酸等。聚丙烯酰胺凝膠具有分子篩作用,有更高的分辨率,普遍用于分離蛋白質(zhì)及小分子核酸。

    3.等電聚焦電泳(isoelectricfocusing,IEF)

    等電點是蛋白質(zhì)的一個重要性質(zhì),測定等電點的方法是在不同pH條件下測量蛋白質(zhì)的電泳遷移率,然后用遷移率對pH作圖,對應于遷移率為零的pH就是蛋白質(zhì)的等電點。按照蛋白質(zhì)等電點不同而進行分離的電泳方法稱為蛋白質(zhì)等電聚焦電泳。醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理由于其分辨率可達到0.01pH單位,故特別適用于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質(zhì)組分。

    4.毛細管電泳(capillaryelectrophoresis,CE)

    毛細管電泳是八十年代初發(fā)展起來的一類高效、快速分離分析方法。同其它技術(shù)相比,毛細管電泳具有分辨率高、塔板數(shù)高、選擇性好、定量準確、所需樣品少等特點。毛細管電泳將電泳載體移到毛細管中后,克服了傳統(tǒng)電泳的熱擴散和試樣擴散的難題,大大提高了分析的靈敏度。因而它是一種比傳統(tǒng)電泳優(yōu)越得多的分離分析技術(shù)。毛細管電泳可分為毛細管區(qū)帶電泳、凝膠電泳、等速電泳、等電聚焦和膠束電動色譜等。

    在生命科學中廣泛使用的是毛細管區(qū)帶電泳(capillaryzoneelectrophoresis,CZE)。毛細管區(qū)帶電泳是近年發(fā)展起來的一種高效、快速的液相分離分析技術(shù),有分離選擇性高、檢測靈敏度高、分離快速、操作簡便和易自動化等特點,現(xiàn)已開始在臨床實驗診斷中得到逐步地應用。

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