方法名稱： ?；撬岬窝垡海；撬幔咝б合嗌V法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定?；撬岬窝垡褐信；撬岬暮?。

本方法適用于?；撬岬窝垡?。

方法原理： 供試品加水稀釋后，取適量依次加入碳酸氫鈉溶液（pH9.0）及1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液，置60℃水浴中加熱1小時(shí)后取出，冷至室溫，加磷酸鹽緩沖液（pH7.0）稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)360nm處檢測(cè)?；撬岬姆迕娣e，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 乙腈

2. 磷酸鹽緩沖液（pH7.0）

3. 0.1mol/L氫氧化鈉溶液

4. 0.5mol/L碳酸氫鈉溶液（pH9.0）

5. 1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按?；撬嵫苌锓逵?jì)算應(yīng)不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（pH7.0） 乙腈 水=70 15 15

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 磷酸鹽緩沖液（pH7.0）

取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1mL，用水稀釋至100mL。

2. 0.1mol/L氫氧化鈉溶液

取氫氧化鈉適量，加水振搖使溶解成飽和溶液，冷卻后，置聚乙烯塑料瓶中，靜置數(shù)日，澄清后備用。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6mL，加新沸過的冷水使成1000mL，搖勻。

3.稱取供試品

精密量取供試品3mL為供試品。

4. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取?；撬釋?duì)照品適量，加水制成每1mL約含1.5mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。

5. 供試品溶液的制備

取供試品置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL，置10mL量瓶中，依次加入0.5mol/L碳酸氫鈉溶液（pH9.0）1mL，1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液0.5mL，搖勻，置60℃水浴中加熱1小時(shí)后取出，冷至室溫，加磷酸鹽緩沖液（pH7.0）稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)360nm處測(cè)定?；撬幔–30H48O3）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p.51。