一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

1.熟悉鄰菲啰啉分光光度法測(cè)定鐵含量的原理和方法。

2.掌握721型分光光度計(jì)的使用方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

根據(jù)朗伯-比爾定律，當(dāng)單色光通過(guò)一定厚度（l）的有色物質(zhì)溶液時(shí)，有色物質(zhì)對(duì)光的吸收程度（用吸光度A表示）與有色物質(zhì)的濃度（c）成正比。

A=k·c·l

其中，k是吸光系數(shù)，它是各種有色物質(zhì)在一定波長(zhǎng)下的特征常數(shù)。在分光光度法中，當(dāng)條件一定時(shí)，k、l均為常數(shù)，此時(shí)，上式可寫成：

A=K·c

因此，一定條件下只要測(cè)出各不同濃度的吸光度值，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)即可繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

在同樣條件下，測(cè)定待測(cè)溶液的吸光度，然后從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出其濃度。

鄰菲啰啉（鄰二氮雜菲）是目前分光光度法測(cè)定鐵含量的較好試劑。在pH=2～9的溶液中試劑與Fe2+生成穩(wěn)定的紅色配合物。該反應(yīng)中鐵必須是亞鐵狀態(tài)，因此，在顯色前要加入還原劑，如鹽酸羥胺翳學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。反應(yīng)如下：

紅色配合物的最大吸收波長(zhǎng)（λmax）為508nm.

三、儀器與藥品

儀器：721型分光光度計(jì)、容量瓶（50mL）、刻度吸量管。

藥品：鄰菲啰啉（8mmol/L，新鮮配制）、鹽酸羥胺（1.5mol/L，臨時(shí)配制）、NaAc（1mol/L）。

標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（2.000mmol/L）：準(zhǔn)確稱取0.7842克（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O置于燒杯中，加入6mol/LHCl120mL和少量蒸餾水，溶解后轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻備用。

四、操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)溶液的配制

取50mL容量瓶7個(gè)，按下表所列的量，用吸量管取各種溶液加入容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。即配成以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液及待測(cè)溶液。

標(biāo)準(zhǔn)溶液及待測(cè)溶液

2.吸光度的測(cè)定

按721型分光光度計(jì)的使用方法（詳見(jiàn)幾種儀器的使用方法）選擇波長(zhǎng)λ＝508nm，用空白溶液調(diào)整儀器，然后測(cè)出所配一系列溶液的吸光度，記錄結(jié)果。

3.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)曲線中Fe2+離子濃度（μmol/L）為橫坐標(biāo)，以吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.待測(cè)水樣中Fe2+離子濃度的測(cè)定

根據(jù)所測(cè)得的水樣的吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得其濃度。

五、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備的問(wèn)題

1.為什么要控制被測(cè)液的吸光度最好在0.15～0.7的范圍內(nèi)？如何控制？

2.由工作曲線查出的待測(cè)鐵離子的濃度是否是原始待測(cè)液中鐵離子的濃度？