血凝試驗（hemagglutinationtest）是紅細胞凝集試驗的簡稱。間接血凝試驗是以紅細胞作為載體的間接凝集試驗，在臨床檢驗中應(yīng)用廣泛，以下簡述其操作過程。

（一）載體

紅細胞是大小均一的載體顆粒，最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細胞及O型人紅細胞。新鮮紅細胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力較差。致敏的新鮮紅細胞保存時間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用2～3天。為此一般在致敏前先將紅細胞醛化，可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。

醛化紅細胞具有較強的吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力，血凝反應(yīng)的效果基本上與新鮮紅細胞相似。如用兩種不同醛類處理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸處理。醛化紅細胞能耐60℃加熱，并可反復(fù)凍融不破碎，在4℃可保存3～6個月，在－20℃可保存一年以上。

（二）致敏

致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白質(zhì)致敏紅細胞的方法有直接法和間接法。直接法只須在低pH，低離子濃度下，用醛化紅細胞直接吸附即可。間接法則需用偶聯(lián)劑將蛋白質(zhì)結(jié)合到紅細胞上。常用偶聯(lián)劑為雙偶氮聯(lián)苯胺（bidiazotizedbenzidine，BDB）和氯化鉻。前者通過共價鍵，后者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質(zhì)與紅細胞表面結(jié)合而達到致敏的目的。