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    蛋白尿分類及發(fā)生機制-檢驗技師考試

    2014-02-07 11:19 來源:
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    醫(yī)學教育網小編搜集了有關檢驗技師考試的復習知識點,供廣大考生參考;如下:

    1.尿蛋白定性試驗:尿蛋白定性為過篩性試驗,目前常用加熱乙酸法、磺基水楊酸法和干化學試帶法。

    (1)加熱乙酸法:為古老傳統的經典方法,加熱煮沸使蛋白變性、凝固,然后加酸使尿PH接近蛋白質等電點(PH4.7)有利于已變性蛋白下沉,同時可消除尿中某些磷酸鹽因加熱析出所致的混濁。干擾因素少,但如加酸過少,過多,致遠離蛋白質等電點,也可使陽性程度減弱。如尿中鹽濃度過低,也可致段阻性。本法檢測尿蛋白的敏感度為0.15g/L.

    (2)磺基水楊酸法:基原量為在略低于蛋白質等電點的PH條件下,蛋白質帶有正電荷的氨基與帶負電荷的磺基水楊酸根相結合,形成不溶性蛋白質鹽而沉淀。該法操作簡便敏感,白蛋白、球蛋白,本周蛋白均可發(fā)生反應。但在用某些藥物如青霉素鉀鹽及有機碘造影劑(膽影葡胺、泛影葡胺、碘酸),或在高濃度尿酸、草酸鹽擴粘蛋白等作用下均可呈假陽性反應,但加熱煮沸后消失,有別于蛋白尿?,F常用為尿蛋白定性試驗過篩方法,本法檢測蛋白尿的敏感度為0.05-0.1g/L.

    (3)干化學試帶法:本法是利用指示劑的蛋白質誤差原理(即拽示劑離子因與白蛋白攜帶電荷相反而結合,故使其反應顯示的PH顏色變?yōu)檩^高PH顏色變化,這種PH顏色改變的幅度與白蛋白含量成正比)而建立的。該法有簡便快速等優(yōu)點,適用于人群普查,還可以用于尿液分析儀,以減少誤差。不同廠家、不同批號試帶顯色有差異,因此應強調節(jié)采用經嚴格標準化的試帶,具體注意事項詳見第八章。

    2.尿蛋白定量測定:尿蛋白定量對腎疾病的診斷及療效觀察有重在意義,悄尿蛋白定量測定法有沉淀法、比濁法、比色法(雙縮脲法)、染料結合法及免疫測定法等。Edbach法因結果粗略且費時太長已被淘汰?;腔畻钏?硫酸鈉雙濁法雖操作簡便,但因線性范圍窄,可受溫度、PH、時間、混勻方式等多種因素影響,故重復性差。此外磺基水楊酸還可與藥物(磺胺、青霉素、有機碘等)及多肽類物質結合導致假陽性,因此目前已少用。比縮脲比色法為蛋白質定量的經典方法,顯色穩(wěn)定、重復性好,對白、球蛋白的反應靈感度較一致其主要缺點為靈感度低,考馬斯亮藍、麗春紅S、溴酚藍、鄰苯三酚紅鉬等染料結合法中然都有靈感度高、操作簡便、快速等優(yōu)點,但考馬斯藍法線性范圍窄,對白、球蛋白反應靈感度不差別,且污染比色杯、不易洗凈。麗春紅S中有干擾因素少的優(yōu)點,但需用三氯乙酸沉淀,操作較繁,職離心沉淀不完全也可影響測定結果。鄰苯三酚紅鉬顯色穩(wěn)定,且對白、球蛋白反應的基本一致但易受表面活性劑的干擾,染料質量常影響試驗結果。免疫測定法是利用單克隆抗體技術的更為靈感、特異的方法,職酶聯系免疫吸附法、免疫比濁法或放射擊免疫法,可分別測定白蛋白以及各種不同的蛋球蛋白,因而可從蛋白的性質協助或定位腎小球或腎小管的損害,也可用于糖尿病腎病的早期診斷,監(jiān)測腎移植術后的排異反應。

    尿蛋白成分復雜、變化大,故在選用方法時應注意試驗與各種蛋白,尤其是白、球蛋白的反應靈感度是否上致有些試劑如磺基水楊酸與白蛋白反應靈感度比球蛋白高近一倍,且受溫度影響很大。另外由于尿蛋白量波動也很大,故應了解各種方法的線性范疇,必在時先做定性試驗,然后將尿標本做適當的稀釋后定量。

    [參考值] 尿蛋白定性試驗:陰性

    尿蛋白定量試驗:<0.1g/L或小于等于0.15g/24h

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