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    生化檢驗中的試劑空白

    2010-07-12 09:37 來源:
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      由于生化測試測量的吸光度為相對吸光度,所以從理論上說,所有終點法的測試都需要把試劑本身的吸光度扣除。試劑本身的吸光度就是試劑空白。測量方法是按照正常測試的試劑和樣本量,把樣本換成蒸餾水來測量。

      在傳統(tǒng)手工方法中,每次測定都要做至少三個管:測定管、標準管、空白管。其中空白管是試劑加蒸餾水,測出來也就是試劑空白。因為操作環(huán)境、儀器狀態(tài)、試劑穩(wěn)定性等變異,所以要求每次都要測定試劑空白,稱為實時試劑空白。

      在全自動分析儀上,大體上是模擬手工操作。但許多全自動分析儀為追求速度,在設計上采用一些折中方法來測定試劑空白。以日立全系列生化儀為例。該系列分析儀是做不了實時試劑空白,因為它們全是先加入樣本后加試劑,為了折中,只好在定標時做一個試劑空白,保存起來,需要扣除試劑空白時再減醫(yī)學教.育網搜集整理這個預先保存的值。這種做法,對于比較穩(wěn)定的試劑來講,對結果影響不大。

      通俗的講,日立的儀器工作流程中首先是將標本加入到比色杯中,然后依次加入R1試劑、R2試劑,所以試劑空白在每個測定項目曲線中是無法看到的。但是7170從CALIBRATION中是可以看到的,S1ABS就是代表試劑空白吸光度,在CALIBRATION畫面里的下方找到ReactionMonitor(反應監(jiān)察),其中STD(1)就是代表試劑空白反應曲線。為了減小誤差,日立儀器會連續(xù)做兩次測定,所以你看到FIRST和SECOND兩條,計算時是取他們的平均值。做試劑空白目的之一就是觀察試劑是否穩(wěn)定,積極采取措施糾正。對于日立的這種試劑空白測定很多儀器都采用這種方法,也叫做試劑空白校準。

      總的說來,自動生化儀上的試劑空白一般表現(xiàn)為零點吸光度,該吸光度是通過校準確立的。

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