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    速率散射比濁分析簡介

    2009-11-04 18:58 來源:
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      (一)基本原理

      速率散射比濁分析是一種動力學(xué)測定方法,在一定條件下,抗原和相應(yīng)的抗體很快結(jié)合成抗原抗體免疫復(fù)合物顆粒,速率比濁法就是在一定時間內(nèi)抗原抗體結(jié)合過程中,測定二者結(jié)合的最大反應(yīng)速度,即反應(yīng)達頂峰峰值。所謂速率是抗原抗體結(jié)合反應(yīng)過程中,在單位時間內(nèi)兩者結(jié)合的速度。速率法是測定最大反應(yīng)速率,即在抗原抗體反應(yīng)達最高峰時,通常為數(shù)十秒鐘,測定其復(fù)合物形成的量。峰值的高低在抗體過量情況下與抗原的量成正比。峰值出現(xiàn)的時間與抗體的濃度及其親和力直接相關(guān)。不同抗原含量其速率峰值不同,通過電腦處理,求出抗原含量。

      (二)抗原過量檢測

      真正的抗原過量檢測是為保證速率散射比濁分析檢測的準確性和精確度,在Beckman公司的生產(chǎn)的ARRY360系統(tǒng)中,設(shè)計有抗原過量檢測系統(tǒng)。其原理是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)形成的濁度不斷增加而設(shè)計的。在抗體固定的情況下,免疫復(fù)合物的生成量隨抗原的增加而增加,當抗原量超過抗體量時,免疫復(fù)合物的量反而減少。根據(jù)這一原理,當標本中的抗原和反應(yīng)液中的抗體結(jié)合后,若反應(yīng)液中有未結(jié)合的抗體存在,再加入抗原時,可見新的速率峰值信號。如果沒有游離的抗體存在,即抗原過剩的情況下,就不會有或者只有很小的新的速率信號出現(xiàn),儀器會重新對標本進行更高稀釋(1:6、1:36、1:216及1:1296等),然后進行測定,使結(jié)果準確可靠醫(yī)學(xué)教.育網(wǎng)搜集整理。

      附:終點散射比濁法

      其原理是讓抗原抗體作用一定時間,使其反應(yīng)達到平衡后,測定其復(fù)合物的量。復(fù)合物的濁度不再受時間的影響,但反應(yīng)復(fù)合物聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前(大約反應(yīng)數(shù)十分鐘)進行濁度測定。敏感度達mg/L水平,可自動化,但反應(yīng)時間較長。

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