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    IgG4酶聯(lián)免疫分析的建立及初步應用

    2009-03-13 16:32 來源:
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      摘 要:用兔抗人IgG4的多克隆抗體(IgG4Ab)包被成固相板,以識別結(jié)合待測標本中的IgG4。用生物素標記IgG4Ab得Bio-IgG4Ab;用親和素標記辣根酶得HRP-A。在已包被IgG4Ab的固相板中加入IgG4標準品(或待測樣品),反應、洗滌后,加入Bio-IgG4Ab,反應、洗滌后,加入HRP-A,反應、洗滌后,板上形成IgG4Ab-IgG4-Bio-IgG4Ab-HRP-A復合物,加酶底物顯色,用酶標儀在490 nm波長測定OD值,作標準曲線,根據(jù)標準曲線,查出標本中IgG4含量。該法測定范圍:2.5~200ng/mL,最低檢出量2.1ng/mL,批內(nèi)和批間CV分別8.4%和11.2%。測得血清IgG4含量:青年人(30名)為37.7±2.3ng/mL;30名獻血員為42.7±9.9ng/mL,49例重癥監(jiān)護患者明顯升高為71.2±9.2ng/mL;49例肺部感染患者明顯降低為28.4±9.2 ng/mL。

      結(jié)果 表明該法穩(wěn)定,靈敏度適于檢出人血清IgG4水平。

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