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    吞噬細(xì)胞功能檢測(cè)

    2011-01-17 11:16 來(lái)源:
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      1.中性粒細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定 較早應(yīng)用的方法為N試驗(yàn),即中性粒細(xì)胞在殺菌過(guò)程中能量消耗劇增、耗氧量增加、糖代謝增強(qiáng),致使糖代謝的中間產(chǎn)物6-磷酸葡萄糖增多,并在己糖途徑中氧化脫氫,脫下的氫可被胞漿中的硝基藍(lán)四氮唑(nitroblue tetrazolium,N)所接受,使原來(lái)淡黃色的N還原成藍(lán)黑色的沉淀物,沉積在胞漿內(nèi)。試驗(yàn)時(shí)取抗凝血與等體積N混合,37℃溫育一定時(shí)間后推片,經(jīng)瑞氏染色后鏡下計(jì)數(shù)百分率,正常人為10%左右,全身性細(xì)菌感染患者可見升高。此外,根據(jù)細(xì)胞的吞噬作用,將抗凝血與等量5×107/ml的菌液混合,經(jīng)37℃溫育一定時(shí)間后推片、染色,于油鏡下觀察細(xì)胞吞噬細(xì)菌的情況并計(jì)算吞噬率和吞噬指數(shù)。

      吞噬率=[吞噬細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)/中性粒細(xì)胞總數(shù)(200個(gè))]×100%

      吞噬指數(shù)=(200個(gè)粒細(xì)菌吞菌總數(shù)/200個(gè)中性粒細(xì)胞)×100%

      2.大吞噬細(xì)胞的檢測(cè) ①巨噬細(xì)胞吞噬功能的檢測(cè):巨噬細(xì)胞具有吞噬大顆粒異物的特性,因此常選用雞紅細(xì)胞、白色念珠菌、酵母菌等作為吞噬顆粒。將通過(guò)斑蟊發(fā)泡法獲得的細(xì)胞與雞紅細(xì)胞懸液于體外37℃溫育一定時(shí)間,離心后取細(xì)胞涂片染色,鏡檢計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù)即可估計(jì)病人巨噬細(xì)胞的吞噬功能。②巨噬細(xì)胞其他功能的測(cè)定:巨噬細(xì)胞具有多種胞內(nèi)和胞外酶,也可分泌一些可溶性因子,這些物質(zhì)在一定程度上可反映該細(xì)胞的功能狀態(tài)。胞內(nèi)酶通過(guò)細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理,例如最常用的酸性磷酸酶及特異性酯酶的測(cè)定。溶菌酶是巨噬細(xì)胞的一種胞外酶,其可在體外溶解細(xì)菌,若將血清與一定量細(xì)菌懸液混勻于比色杯內(nèi),經(jīng)光電比色后記錄每分鐘光密度變化百分率,與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比即可得出標(biāo)本中血清溶菌酶的含量。

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