(一)電解質(zhì)
抗原與抗體發(fā)生結(jié)合后,由親水膠體變?yōu)槭杷z體的過(guò)程中,須有電解質(zhì)參與才能進(jìn)一步使抗原抗體復(fù)合物表面失去電荷,水化層破壞,復(fù)合物相互靠攏聚集形成大塊的凝集或沉淀。醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理若無(wú)電解質(zhì)參加,則不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。為了促使沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%~0.9%(人、畜)或8%~10%(禽)的氯化鈉或各種緩沖液(免疫標(biāo)記技術(shù))作為抗原和抗體的稀釋液或反應(yīng)液。但電解質(zhì)的濃度不宜過(guò)高,否則會(huì)出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。
(二)溫度
在一定溫度范圍內(nèi),溫度越高,抗原、抗體分子運(yùn)動(dòng)速度越快,這可以增加其碰撞的機(jī)會(huì),加速抗原抗體結(jié)合和反應(yīng)現(xiàn)象的出現(xiàn),如凝集和沉淀反應(yīng)通常在37℃水浴感作(即將試驗(yàn)材料加蓋保濕恒溫作用)一定時(shí)間醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,以促進(jìn)反應(yīng)現(xiàn)象的出現(xiàn),若用56℃水浴則反應(yīng)更快。但有的抗原抗體結(jié)合則需長(zhǎng)時(shí)間在低溫下,才能使反應(yīng)完成的比較充分、徹底,如有的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)在0℃~4℃冰箱結(jié)合效果更好。
(三)酸堿度
血清學(xué)試驗(yàn)要求在一定的pH下進(jìn)行,常用的pH值為6~8,過(guò)高或過(guò)低,均可使已結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物重新解離。若pH降至抗原或抗體的等電點(diǎn)時(shí),會(huì)發(fā)生非特異性的酸凝集,造成假象。
(四)振蕩
適當(dāng)?shù)臋C(jī)械振蕩能增加分子或顆粒間的相互碰撞,加速抗原抗體的結(jié)合反應(yīng),但強(qiáng)烈的振蕩可使抗原抗體復(fù)合物解離。
(五)雜質(zhì)和異物
試驗(yàn)介質(zhì)中如有與反應(yīng)無(wú)關(guān)的雜質(zhì)、異物(如蛋白質(zhì)、類(lèi)脂質(zhì)、多糖等物質(zhì))存在時(shí),醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理會(huì)抑制反應(yīng)的進(jìn)行或引起非特異性反應(yīng),故每批血清學(xué)試驗(yàn)都應(yīng)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照試驗(yàn)。
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