【摘要】  目的   觀察氟化食醋處理離體乳牙不同時間點對釉質(zhì)組織和形態(tài)學(xué)的改變。方法  采用體視顯微鏡、偏光顯微鏡和掃描電鏡觀察食醋涂擦釉質(zhì)后釉質(zhì)表面超微結(jié)構(gòu)和組織學(xué)改變。食醋處理為37℃，每天10次，每次5min，設(shè)去離子水為對照組。結(jié)果   體視顯微鏡觀察表明，對照組未見釉質(zhì)脫礦，實驗組24h后釉質(zhì)有輕度改變，隨時間延長，釉質(zhì)表面組織缺損依次嚴重。偏光顯微鏡觀察磨片浸喹啉后脫礦區(qū)呈負性雙折射，而浸水呈正性雙折射。掃描電鏡觀察脫礦從晶體中心逐漸向周圍擴展。結(jié)論   食醋可使乳牙牙釉質(zhì)脫礦。

　　【關(guān)鍵詞】  醋；牙釉質(zhì)；體視顯微鏡；偏光顯微鏡；掃描電鏡

　　A study of histological and morphological alteration of deciduous tooth enamel caused by vinegar

　　XUE Zhi-guo”BAO Ping-ping”LI Bing”et al.Oral Department of Shanxi Railway Hospital”Shanxi Taiyuan 030013”China

　　【Abstract】  Objective  To observe the histological and morphological alteration on deciduous enamel surface caused by vinegar.Methods  The histological and morphological alteration of deciduous enamel dipped in the vinegar were observed by stereomicroscopy ”polarized light microscopy and scanning electron microscope after  the first day” 3rd day ”5th day ”7th day′s exposure to the  vinegar‘’5min each time and 3 times each day.Results  Stereomicroscopy showed all the specimens except the compared group treated by ion-off water lost their gloss and had irregular loss of dental tissue in various degree. The longer the enamel exposure to the vinegar” the severer the alteration if the enamel was. Polarized light microscope showed that the demineralized area revealed negative birefringence when it were examined in water .Different degree of solubilization expanded from center to perimeter of enamel crystal were demonstrated by scanning electron microscope. Conclusion  Vinegar have erosive effect on deciduous enamel.

　　【Key words】  vinegar；tooth enamel； stereomicroscopy；polarized light microscopy ；scanning electron microscope

　　食醋自古就應(yīng)用于菜肴、魚類的烹調(diào)以及醋浸菜食品的調(diào)味方面。最近隨著消費者的生活水平的提高，食醋功能的闡明，食醋用途日趨廣泛已然超越調(diào)味領(lǐng)域，初步進入營養(yǎng)保健行列。本研究旨在研究食醋對乳牙牙釉質(zhì)的影響，從而提醒人們注意對牙釉質(zhì)的損害及合理食用食醋。

　　1  材料與方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  牙齒  采用新鮮拔除的滯留乳牙40顆，挑選無齲，無裂紋，無白斑者。截根去髓，將冠部牙片置于0.2%的苯扎溴胺生理鹽水溶液中，4℃保存?zhèn)溆谩?/P>

　　1.1.2  食醋  選用太原市超市內(nèi)售的山西老陳醋。

　　1.1.3  人工唾液  配方采用ISO/TR/0271：1993標準［1］。

　　1.2  方法

　　1.2.1  標本制備  將50個乳牙于唇中1/3開窗，直徑為4mm，其余部分指甲油涂布，隨機均分給4個實驗組及1個對照組。先將標本放入37℃人工唾液恒溫水浴7天，再進行浸泡實驗，浸泡實驗為間斷性，取15μl食醋滴加于釉質(zhì)面，于37℃孵育5min，10次/d，處理在12h內(nèi)完成［2］。處理間隙置于人工唾液中過夜，處理后的食醋收集于0.5ml的Eppendorf管中，于-20℃凍存用于測定食醋中鈣含量的變化，乳牙標本用于組織形態(tài)學(xué)觀察。

　　1.2.2  標本觀察前處理  分別于實驗1天、3天、 5天、7天處理結(jié)束后，經(jīng)超聲波清洗1h以去除牙冠上的指甲油，超聲清洗的溶液依次為丙酮、水、中性洗滌劑和乙醇。清洗完成以后將各組標本先經(jīng)肉眼及體視顯微鏡檢查，然后各組分別選取一半用于掃描電鏡觀察，一半用于偏光顯微鏡檢查。

　　1.2.3  偏光顯微鏡樣品的制備和觀察  用自凝塑料將牙齒包埋‘’用低速鋸床從釉質(zhì)開窗區(qū)的中央將牙齒鋸開，然后切成約300μm厚的牙片，用蜂蠟和冷杉膠混合膠貼附于載玻片上，待冷固后，流水下磨制成薄片，約100μm，用粒度為1200目的砂紙拋光。吸水干燥后，將載玻片放入二甲苯內(nèi)，使混合膠溶解，磨片載玻片分離，每組樣本制作2張磨片，分別用于浸水和喹啉，浸泡24h后用偏光顯微鏡觀察。

　　1.2.4  掃描電鏡標本的制備及觀察  取各組樣本，釉質(zhì)表面鍍鉑，在掃描電鏡（HETACHIX-650 SEM）下觀察乳牙唇面釉質(zhì)浸泡不同時間點表面形態(tài)的變化。

　　2  結(jié)果

　　2.1   肉眼觀察  對照組牙面無明顯改變，1天后可見牙齒表面失去光澤，有些牙面有輕度白堊色改變，3天組牙齒有色素沉著，5天、7天組牙齒顏色加深，白堊色改變嚴重。

　　2.2  偏光顯微鏡觀察  對照組及1天組整個釉質(zhì)呈負雙折射，與正常釉質(zhì)表現(xiàn)相同。3天組的標本經(jīng)喹啉浸漬后可見釉質(zhì)淺層為負性雙折射，其下是一層較狹窄的呈正性雙折射的暗帶，而用水浸漬的標本可見釉質(zhì)表面窄的負性雙折射區(qū)，其下是一條呈正性雙折射的寬的暗區(qū)。5天、7天組經(jīng)喹啉浸漬后，可觀察到較寬的負性雙折射區(qū)，未見正性雙折射的暗帶，而經(jīng)水浸漬后，可見正性雙折射的損害區(qū)，未見呈負性雙折射的表層。

　　2.3  掃描電鏡觀察  對照組牙表面結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變，1天組僅見牙齒表面細微的裂溝，3天組見釉質(zhì)中心的晶體輕度溶解，5天組釉柱中心破壞，偶見柱間隙增寬。7天組釉柱中心及柱間隙遭到破壞，使脫礦嚴重的區(qū)域連成一片。

　　3  討論

　　3.1  釉質(zhì)結(jié)構(gòu)  釉質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)是釉柱，釉柱由羥基磷灰石晶體構(gòu)成，釉質(zhì)的晶體之間存在微小的縫隙，可能含有水和有機物，是釉質(zhì)的擴散通道。營養(yǎng)物質(zhì)的運輸及脫礦與再礦化就是通道發(fā)生的。釉質(zhì)內(nèi)晶體不是化學(xué)純的羥基磷灰石，還含有2%～4%的碳酸鹽和1%非鈣金屬，純的羥基磷灰石不宜溶于酸，但含碳酸基團的羥基磷灰石則不同，它易溶于酸［3］。

　　3.2  食醋對乳牙牙釉質(zhì)組織形態(tài)學(xué)的影響  我國的食醋有許多種，例如常德香醋、北京龍門熏醋、吉林米醋、山西熏醋、山西老陳醋及四川三匯醋等等。其pH值多在2.87～3.87之間。本實驗所選山西老陳醋pH值為3.31，總酸度為10.38%.當食醋酸性物質(zhì)接觸牙釉質(zhì)表面時，其中的酸對釉質(zhì)表面有直接的酸蝕脫礦作用。而乳牙的礦化程度本身就低，易受理化性質(zhì)影響。本實驗結(jié)果顯示，通過食醋處理乳牙牙釉質(zhì)后，食醋中的酸直接作用于釉質(zhì)中的羥基磷灰石晶體，導(dǎo)致羥磷灰石晶體的溶解、破壞。處理1天組與對照組釉質(zhì)成負性雙折射與正常釉質(zhì)相同，可能是由于時間較短，即便有輕度脫礦，唾液的再礦化作用可以抵消的緣故。3天組偏光顯微鏡發(fā)現(xiàn)釉質(zhì)淺層為負性雙折射，其下有一層較窄的暗帶，可能是由于晶體孔隙增加，且孔隙大小不一，喹啉大分子物質(zhì)不能進入叫小的孔隙中，因而小孔隙由空氣占據(jù)，空氣折光率為1.0，與正常釉質(zhì)的折光率相差較大，偏光透過時，產(chǎn)生較大散射，故呈暗色。3天、5天組羥磷灰石晶體破壞嚴重，標本經(jīng)喹啉浸漬后，可見較寬的負性雙折射區(qū)，未見到正性雙折射的暗帶，水浸漬后見到正性雙折射的損害而未見負性雙折射的表層。說明此時脫礦區(qū)孔隙較大，喹啉可以進入，與正常釉質(zhì)折光率相近，而水分子進入后，其折光率為1.33，與正常釉質(zhì)略有差異所致。

　　因此，本實驗說明食醋對乳牙牙釉質(zhì)具酸蝕脫礦的作用，應(yīng)注意經(jīng)常食用食醋后對牙齒的保護。同時我們可以通過食醋配方的改進調(diào)整，例如增加F制劑以抵抗食醋中酸的作用，但這仍有待進一步的研究。

　　【參考文獻】

　　1  ISO TR 10271.Dentistry determination of tarnish and corrosion of metals and alloys.Switzerland.1993”3

　　2  Grenby TH”Philips A”Desai T”et al. Laboratory studies of the dental properties of soft drinks. Dr J Nutr”62（2）：451-464.

　　3  岳松齡?，F(xiàn)代齲病學(xué)。北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社。1993，178.

　　4  包啟安。食醋科學(xué)與技術(shù)。北京：科學(xué)普及出版社，1999，95-99