【摘要】 目的：研究達(dá)斡爾民族X染色體遺傳結(jié)構(gòu)與親屬關(guān)系。 方法： 選擇9個(gè)XSTR（DXS6804，DXS7133，DXS101，DXS6789，DXS6799，DXS7423，HPRTB，DXS8378，DXS7132），分析其多態(tài)性分布及與其他群體間的遺傳距離和聚類關(guān)系。 結(jié)果：研究群體中共檢出51種等位基因，頻率分布在0.0161～0.6935；基因型頻率、雜合度、個(gè)體識(shí)別率、多態(tài)性信息量等群體遺傳學(xué)指標(biāo)分析顯示，9個(gè)STR位點(diǎn)可用于群體遺傳學(xué)研究和法醫(yī)學(xué)應(yīng)用；聚類分析和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析發(fā)現(xiàn)達(dá)斡爾和鄂倫春族有較近的遺傳距離。 結(jié)論：此9個(gè)XSTR位點(diǎn)具有較高的個(gè)體識(shí)別率和多態(tài)性信息量，可用于群體遺傳學(xué)研究、法醫(yī)學(xué)應(yīng)用和疾病連鎖分析。
【關(guān)鍵詞】 X染色體 短串聯(lián)重復(fù)序列 遺傳多態(tài)現(xiàn)象 遺傳距離 達(dá)斡爾族 親屬關(guān)系
0.引言
內(nèi)蒙古地區(qū)是我國(guó)乃至世界上最大的多民族聚居地，居住著漢族、蒙古族、鄂溫克族、鄂倫春族、達(dá)斡爾族等55個(gè)民族（除了珞巴族外），形成了中國(guó)最大最豐富的遺傳信息庫(kù)，這是世界上任何一個(gè)其它地區(qū)無法比擬的。 因此，對(duì)研究我國(guó)，甚至世界民族的起源、形成、發(fā)展與演變具有非常重要的價(jià)值。 在內(nèi)蒙古地區(qū)55個(gè)民族中蒙古族、鄂溫克族、鄂倫春族、達(dá)斡爾族四個(gè)民族為內(nèi)蒙古地區(qū)的主要少數(shù)民族。 各族群之間相對(duì)隔離，有關(guān)民族特有等位基因、基因型及基因頻率的研究資料缺乏。 這無疑會(huì)對(duì)研究中華民族群體起源、人群遺傳差異、法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別、民族特有疾病譜等帶來不利的影響［1-2］。 我們的目的是通過9個(gè)XSTR基因標(biāo)記的遺傳學(xué)分析，調(diào)查內(nèi)蒙古地區(qū)達(dá)斡爾民族群體遺傳結(jié)構(gòu)及變化規(guī)律。
1.對(duì)象和方法
1.1對(duì)象樣本取自內(nèi)蒙古自治區(qū)，莫力大瓦達(dá)斡爾族自治旗，河扎蘭屯市達(dá)斡爾民族鄉(xiāng)87（男56，女31）例達(dá)斡爾族健康無關(guān)個(gè)體。 采取靜脈血2 mL，EDTA抗凝。 每個(gè)供血個(gè)體均追溯3代以上家族史，以確定其民族代表性。
1.2方法采用Chelex100法，從87例達(dá)斡爾民族群體的健康無關(guān)個(gè)體中成功提取基因組DNA，含量在10~50 mg/L之間。 PCR擴(kuò)增樣本DNA，變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，結(jié)合銀染顯色技術(shù)，選用等位基因大小標(biāo)記進(jìn)行分型，觀察X染色體STR遺傳標(biāo)記包括DXS6789，DXS101，DXS8378，DXS7132，DXS7133，DXS7423，DXS6804，DXS6799，HPRTB等 9個(gè)XSTR位點(diǎn)等位基因分布。
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理： 統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0計(jì)算各位點(diǎn)基因型頻率和等位基因頻率，χ2檢驗(yàn)對(duì)基因型頻率（女性）進(jìn)行HW平衡檢驗(yàn)，并進(jìn)行聚類分析［3］；Powerstats軟件計(jì)算各種法醫(yī)學(xué)應(yīng)用指標(biāo)（包括雜合度、個(gè)體識(shí)別力、非父排除率等）［4］。 Mega3.0計(jì)算遺傳距離，繪制系統(tǒng)進(jìn)化樹［5］。
2.結(jié)果
2.1達(dá)斡爾族9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)分型部分結(jié)果如圖1.
2.2達(dá)斡爾族9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)等位基因頻率9個(gè)XSTR位點(diǎn)共檢測(cè)出51個(gè)等位基因，頻率分布在0.0161～0.6935之間， 各位點(diǎn)等位基因分布不均一（表1）。表1達(dá)斡爾族9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)等位基因頻率
2.4達(dá)斡爾族9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)多態(tài)性指標(biāo)統(tǒng)計(jì)顯示9個(gè)XSTR位點(diǎn)的雜合度（H）、多態(tài)性指標(biāo)（PIC）、個(gè)體識(shí)別力（PD）均達(dá)到法醫(yī)學(xué)應(yīng)用指標(biāo)， 9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)聯(lián)合構(gòu)成的多態(tài)性指標(biāo)是0.99998（表3）。 對(duì)基因型頻率（女性）進(jìn)行HW平衡檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，除位點(diǎn)DXS7133之外（P<0.05），其他基因座基因型頻率分布都符合HW平衡定律。 表2達(dá)斡爾族女性9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)的等位基因型頻率［醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) 搜集整理］
3.討論
3.1達(dá)斡爾民族X染色體STR的遺傳結(jié)構(gòu)在達(dá)斡爾族群體中，9個(gè)XSTR位點(diǎn)共檢測(cè)出51個(gè)等位基因，88個(gè)基因型。 在9個(gè)XSTR位點(diǎn)中，有四個(gè)位點(diǎn)等位基因分布顯著不均，分別是DXS7133， DXS6799， DXS8378和DXS7423. DXS7133位點(diǎn)的等位基因9為高頻，等位基因10和11的頻率為中頻，而等位基因8的頻率為低頻；DXS6799位點(diǎn)的等位基因11為高頻，等位基因10和12的頻率為中頻，而等位基因8， 9， 13的頻率為低頻；DXS8378位點(diǎn)的等位基因9為高頻，等位基因10和11的頻率為中頻，而等位基因8， 12， 13的頻率為低頻； DXS7423位點(diǎn)的等位基因15為高頻，等位基因14為中頻，而等位基因13， 16為低頻。 其余5個(gè)位點(diǎn)的等位基因在鄂溫克族人群中分布比較均一。表3內(nèi)蒙古地區(qū)達(dá)斡爾族9個(gè)XSTR基因位點(diǎn)多態(tài)性指標(biāo)表4內(nèi)蒙古地區(qū)四個(gè)主要少數(shù)民族、西安漢族之間的遺傳距離在9個(gè)XSTR位點(diǎn)中，DXS6789位點(diǎn)的多態(tài)性最高（等位基因分布最廣），其次為DXS101， DXS8378和DXS6799，而DXS7133和DXS7423位點(diǎn)的多態(tài)性最低；多態(tài)性指標(biāo)PIC值也印證了這一點(diǎn)。 因此，在使用XS7133和DXS7423位點(diǎn)進(jìn)行法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別時(shí)要注意，需要增加其他XSTR位點(diǎn)，從而提高個(gè)體識(shí)別能力［6］。
3.2民族遺傳差異以及親屬關(guān)系比較
3.2.1達(dá)斡爾族在內(nèi)蒙古地區(qū)的起源及形成關(guān)于達(dá)斡爾族的族源，學(xué)術(shù)界主要有三種說法：一是土著說，土著說認(rèn)為達(dá)斡爾人最初分布在黑龍江及精奇里江河谷，隋、唐時(shí)是室韋各部的分布地。 以后遼、金、元各代都在這些地區(qū)行使管轄權(quán)。 二是蒙古同源說。 根據(jù)達(dá)斡爾語與蒙古語都屬于阿爾泰語系蒙古語族，相互之間有相同或相近的成分，有人認(rèn)為達(dá)斡爾的祖先是成吉思汗統(tǒng)一蒙古各部以前的古代蒙古各部落的一支，因而與現(xiàn)在的蒙古族有共同的族源。 三是契丹遺裔說。 根據(jù)語言、歷史傳說及某些習(xí)俗與遼代契丹人有相同特點(diǎn)，認(rèn)為達(dá)斡爾族的祖先是契丹人的一支，于金滅遼時(shí)遷至黑龍江以北，發(fā)展為達(dá)斡爾族。［醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) 搜集整理］
3.2.2達(dá)斡爾族在內(nèi)蒙古地區(qū)民族的語系關(guān)系達(dá)斡爾族語言屬阿爾泰語系/蒙古語族/達(dá)斡爾語。 它用達(dá)斡爾語記音符號(hào)來記錄達(dá)斡爾語。 達(dá)斡爾語詞匯與蒙古語同源的約占50%，與滿通詞同源的約占10%，漢語借詞約占10%. 達(dá)斡爾語保存了不少古詞語，其中有的與契丹語相同，如Kasoo“鐵”，有的與十三世紀(jì)的蒙古語相同，如terwul“路”、 honi“煙”等。 此外， 達(dá)斡爾語還有一些不同于現(xiàn)代任何語言其來源的詞。
本實(shí)驗(yàn)9個(gè)XSTR位點(diǎn)基因頻率計(jì)算的遺傳距離顯示，鄂倫春族與達(dá)斡爾族之間的遺傳距離較近；而達(dá)斡爾族與鄂溫克族、達(dá)斡爾族與西安漢族之間的遺傳距離較遠(yuǎn)。 另外，內(nèi)蒙古地區(qū)蒙古族、鄂溫克族、鄂倫春族、達(dá)斡爾族及西安漢族五個(gè)群體之間的等位基因分布差異性比較［6-9］， 三種方法和結(jié)果相互印證，共同表明所研究達(dá)斡爾族群體與鄂倫春族之間的遺傳關(guān)系相對(duì)最近，而與鄂溫克族、蒙古族、漢族遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)。 該結(jié)果與地理分布、語系分布及民族演變歷史相吻合。 而地理位置相距遙遠(yuǎn)的西安漢族和蒙古族之間有很近的遺傳距離，這表明，親屬關(guān)系在民族間遺傳距離和基因漂流的形成中扮演著比地理位置更為重要的角色［10-11］。
本研究從分子遺傳學(xué)角度闡明內(nèi)蒙古地區(qū)達(dá)斡爾民族的遺傳結(jié)構(gòu)和特色，與語系關(guān)系及民族歷史演變特點(diǎn)相吻合；同時(shí)，獲得的X染色體STR遺傳學(xué)數(shù)據(jù)在疾病連鎖分析、遺傳制圖、法醫(yī)學(xué)鑒定等領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。
致謝感謝通木爾，李曉鐘，歐拉，趙君海在樣本采集中的工作；感謝余兵博士給予的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。
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