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考試輔導(dǎo)
首先把IPTG配制成24 mg/ml(100 mM)的水溶液,并進(jìn)行過(guò)濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體),然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基,可根據(jù)長(zhǎng)出菌體的藍(lán)白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。
誘導(dǎo)外源基因的表達(dá),普遍應(yīng)用于原核表達(dá)系統(tǒng),使其表達(dá)量增高,產(chǎn)物穩(wěn)定,具有易鑒定,易純化的優(yōu)點(diǎn)。