方法名稱：

草烏甲素的測定—高效液相色譜法

應用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測定草烏甲素（C35H49NO10）的含量。

本方法適用于草烏甲素。

方法原理：

供試品經(jīng)稱取制成流動相溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處檢測草烏甲素吸收值，計算出其含量。

試劑：

1.乙腈

2. 0.2%三乙胺水溶液（磷酸調(diào)pH值至3.1±0.1）

3. 磷酸

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按草烏甲素峰計算應不低于 3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：乙腈+0.2%三乙胺水溶液= 40+60

2.2 檢測波長：260nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

精密稱取本品試樣20mg。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取草烏甲素對照品20mg，加流動相分別制成每1mL含0.02mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

將供試品用流動相稀釋，制成每1mL含0.02mg的溶液，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處測定草烏甲素的吸收值，計算出其含量。

參考文獻：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.373。