方法名稱： 去乙酰毛花苷注射液—去乙酰毛花苷的測定—分光光度法

應用范圍： 本方法采用分光光度法測定去乙酰毛花苷注射液中去乙酰毛花苷的含量。

本方法適用于去乙酰毛花苷注射液。

方法原理： 供試品加70%乙醇定量稀釋制成供試液，再加入堿性三硝基苯酚試液后，在20~25℃放置30分鐘，置紫外可見分光光度計，于485nm波長處測定吸收度，計算出其含量。

試劑： 70%乙醇

儀器設備： 紫外可見分光光度計

試樣制備： 1.對照品溶液的制備

精密稱取去乙酰毛花苷對照品適量，加70%乙醇使溶解，制成每1mL含去乙酰毛花苷40µg的溶液，即得對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密量取供試品5mL，置25mL量瓶中，用70%乙醇的稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 精密量取對照品溶液與供試品溶液各10mL，分別精密加入堿性三硝基苯酚試液6mL，搖勻，在20~25℃放置30分鐘后，照紫外分光光度法，于波長485nm處測定吸收度。

注：分光光度法應以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數，再計算含量。