方法名稱： 醋酸潑尼松—醋酸潑尼松的測定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定醋酸潑尼松的含量。

本方法適用于醋酸潑尼松。

方法原理： 供試品用甲醇溶解并稀釋成一定濃度的溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處檢測醋酸潑尼松的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 甲醇（色譜純）

2. 水（色譜純）

3. 氫化可的松

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按醋酸潑尼松峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000，醋酸潑尼松與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰分離度應(yīng)符合規(guī)定。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇-水= 58 42

2.2 檢測波長：240nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

取醋酸潑尼松對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋稱每1mL中含0.40mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2. 供試品溶液的制備

取本品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋稱每1mL中約含0.40mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

取氫化可的松適量，加甲醇制成每1mL中約含0.30mg的溶液，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處測定，記錄色譜圖，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算其含量。