方法名稱:
三七片-人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的測定-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:
本方法采用高效液相色譜法測定三七片中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。
本方法適用于中成藥三七片。
方法原理:
本品加甲醇加熱回流,放冷,補重,搖勻,濾過,續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長203nm處檢測人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的吸收值,計算出其含量。
試劑:
1. 甲醇
2. 乙腈
儀器設(shè)備:
1 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按三七皂苷R1峰計算應(yīng)不低于4000。
1.3 紫外吸收檢測器
2色譜條件
2.1流動相:乙腈為流動相A,水為流動相B
時間(分鐘)
流動相A(%)
流動相B(%)
0~12
19
81
12~60
19→36
81→64
2.2檢測波長:203nm
2.3柱溫:室溫
試樣制備:
1. 稱取供試品
取本品10片,精密稱定,研細(xì),取約0.8g,精密稱定,為供試品。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Rb1對照品和三七皂苷R1對照品適量,加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rg10.4mg、人參皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.1mg的混合溶液。
3. 供試品溶液的制備
取本品10片,精密稱定,研細(xì),取約0.8g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇50mL,稱定重量,放置過夜,置80℃水浴上加熱回流2小時,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,作為供試品溶液。
操作步驟:
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長203nm處測定人參皂苷Rb3(C53H90O22)的峰面積,計算出其含量。
參考文獻(xiàn):
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,一部,p323。