方法名稱： 葛根芩連片-葛根素的測定-高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定葛根芩連片中葛根素的含量。

本方法適用于葛根芩連片中葛根素的含量測定。

方法原理： 供試品用甲醇回流提取后，過濾，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長250nm處檢測葛根素的吸收值，計算出其含量。

試劑：

 1.甲醇

2.二次重蒸水

儀器設(shè)備：

 1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋水（23：77）。

2.2 檢測波長：250nm

2.3 溫度：35℃。

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

精密稱取葛根素對照品10mg，置10m1棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL，置于50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備甲醇

取葛根芩連片20片，精密稱定，求得平均片重。研細。精密稱取葛根芩連片細粉適量(約相當(dāng)于葛根0.lg)，置150m1三角燒瓶中，精密加入甲醇100m1，精密稱定。水浴加熱回流提取1h，放冷至室溫，精密稱量下準(zhǔn)確補加損失的甲醇，搖勻。取少量用0.45mm濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長250nm處測定葛根素的吸收值，計算出其含量。