方法名稱：

丁酸氫化可的松原料藥－丁酸氫化可的松－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測定丁酸氫化可的松原料藥中丁酸氫化可的松的含量。

本方法適用于丁酸氫化可的松原料藥。

方法原理：

供試品經(jīng)甲醇溶解并定量稀釋，加入內(nèi)標(biāo)后再經(jīng)甲醇定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處檢測丁酸氫化可的松的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 乙腈

2. 冰醋酸

3. 甲醇

4. 甲睪酮

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按丁酸氫化可的松峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：水 乙腈 冰醋酸=55 45 0.5

2.2 檢測波長：240nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取甲睪酮適量，加甲醇制成每1mL中含0.18mg的溶液，即為內(nèi)標(biāo)溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取丁酸氫化可的松對照品適量，加甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.26mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.26mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長240nm處測定丁酸氫化可的松（C25H36O6）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.21。