第一,金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)
樣品處理:無菌取25g或25mL食品樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中均質(zhì),制成10-1稀釋液。
增菌培養(yǎng):將10-1稀釋液接入7.5%NaCl肉湯或胰蛋白胨肉湯中,37°C培養(yǎng)24小時(shí)。
分離培養(yǎng):將上述稀釋液或培養(yǎng)液分別劃線血平板和Baird-Parker平板,置37°C培養(yǎng)24~48小時(shí)。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落為圓形,直徑2~3mm,顏色灰或黑色,周圍有一渾濁帶。
染色觀察:從平板上挑取可疑性菌落進(jìn)行革蘭氏染色,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性,顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜,直徑0.5~1μm。
血漿凝固酶試驗(yàn):吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌試液浸液肉湯24小時(shí)培養(yǎng)物充分混勻,置36±1°C培養(yǎng),每隔半小時(shí)觀察一次,連續(xù)觀察6小時(shí),出現(xiàn)凝固,即將小試管傾斜或倒置時(shí),內(nèi)容物不流動(dòng),判為陽性。同時(shí)做陰陽性對照。url]耐熱核酸酶試驗(yàn):將24小時(shí)肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min,用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭-DNA平板,36±1°C培養(yǎng)24小時(shí),在刺種線周圍出現(xiàn)淡粉色者為陽性。本試驗(yàn)金黃色葡萄球菌為陽性。
第二,金黃色葡萄球菌腸毒素檢測
金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動(dòng)物試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附等方法,在此就不一一贅述。