方法名稱： 苯巴比妥片－苯巴比妥－高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定苯巴比妥片中苯巴比妥的含量。

本方法適用于苯巴比妥片。

方法原理： 供試品經(jīng)40%甲醇溶液溶解并用水稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長215nm處檢測苯巴比妥的峰面積，計算出其含量。

試劑： 40%甲醇溶液

儀器設備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按苯巴比妥峰計算不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 磷酸鹽緩沖液=40 60

2.2 檢測波長：215nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

精密稱取苯巴比妥對照品適量，用40%甲醇溶解并定量稀釋制

2. 供試品溶液的制備

取供試品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于苯巴比妥30mg），置100mL量瓶中，加40%甲醇溶液適量，超聲處理10分鐘使苯巴比妥溶解，加40%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置50mL量瓶中，加40%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長215nm處測定苯巴比妥（C12H12N2O3）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，二部，p.317。