方法名稱(chēng):
復(fù)方黃連素片-鹽酸小檗堿的測(cè)定-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:
該方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方黃連素片中鹽酸小檗堿的含量。
該方法適用于中成藥復(fù)方黃連素片。
方法原理:
供試品細(xì)粉溶于沸水中,加鹽酸處理,上清液用流動(dòng)相稀釋?zhuān)M(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)265nm處檢測(cè)鹽酸小檗堿的峰面積,計(jì)算出其含量。
試劑:
1.乙腈
2.稀鹽酸 取鹽酸234mL,加水稀釋至1000mL
3. 磷酸二氫鉀溶液,0.033mol/L
儀器設(shè)備:
1 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
1.3 紫外吸收檢測(cè)器
2 色譜條件
2.1 流動(dòng)相:乙腈 0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液 = 40 60
2.2 檢測(cè)波長(zhǎng):265nm
2.3 柱溫:室溫
試樣制備:
1.稱(chēng)取供試品
取該品20片,除去糖衣,精密稱(chēng)定,求出平均片重,研細(xì),精密稱(chēng)取總重量的1/20,為供試品。
2.對(duì)照品溶液的制備
精密稱(chēng)取在100°C干燥的鹽酸小檗堿對(duì)照品約25mg,置250ml燒杯中,加沸水約150ml使溶解,稍冷后加入稀鹽酸3ml,攪勻,放冷,轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,精密量取2ml,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻(每1mL含鹽酸小檗堿0.008mg)。
3,供試品溶液的制備
供試品置250ml燒杯中,加沸水約150ml使溶解,稍冷后加入稀鹽酸3ml,攪勻,放冷,轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,離心(每分鐘轉(zhuǎn)速位4000轉(zhuǎn)),精密量取上清液2ml,置25ml量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。
注:“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。
操作步驟:
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)265nm處測(cè)定鹽酸小檗堿(C20H17NO4 · HCl)的峰面積,計(jì)算出其含量。
參考文獻(xiàn):
中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,一部,p534。