方法名稱： 異福酰胺片－利福平、異煙肼與吡嗪酰胺－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定異福酰胺片中利福平、異煙肼與吡嗪酰胺的含量。

本方法適用于異福酰胺片。

方法原理： 供試品加流動相溶解并稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測利福平、異煙肼與吡嗪酰胺的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 庚烷磺酸鈉溶液（0.01mol/L）

2. 乙腈

3. 稀磷酸

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

氰基鍵合硅膠為填充劑

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液（稀磷酸調(diào)節(jié)pH值至.2） 乙腈=44 56

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

精密稱取利福平對照品、異煙肼對照品和吡嗪酰胺對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋制成與供試液濃度相同的溶液，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品10片，除去薄膜衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于利福平60mg），置100mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長254nm處測定利福平（C43H58N4O12）、異煙肼（C6H7N3O）、吡嗪酰胺（C5H5N3O）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.221。