方法名稱：

注射用氫化可的松琥珀酸鈉—氫化可的松琥珀酸鈉的測(cè)定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定注射用氫化可的松琥珀酸鈉中氫化可的松琥珀酸鈉（C25H33NaO8）的含量。

本方法適用于注射用氫化可的松琥珀酸鈉。

方法原理：

供試品經(jīng)稱取制成流動(dòng)相溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)242nm處檢測(cè)氫化可的松琥珀酸鈉吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 磷酸鹽緩沖液

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按氫化可的松琥珀酸鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 磷酸鹽緩沖液=43 57

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：242nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 磷酸鹽緩沖液

8mmol/L磷酸二氫鉀溶液，用8mmol/L磷酸氫二鉀溶液調(diào)pH值5.0±0.1，臨用前新配。

2. 稱取供試品

取本品裝量差異項(xiàng)下混合均勻的內(nèi)容物適量，精密稱定。

3. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取氫化可的松琥珀酸鈉對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋成每1mL含40μg的溶液。

精密稱取氫化可的松對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋成每1mL含10μg的溶液。

4. 供試品溶液的制備

將上述供試品加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1mL含40μg的溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，出峰順序依次為17-氫化可的松琥珀酸鈉、21-氫化可的松琥珀酸鈉和游離氫化可的松，用紫外吸收檢測(cè)器，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，17-氫化可的松琥珀酸鈉峰和21-氫化可的松琥珀酸鈉峰面積總和，作為氫化可的松琥珀酸峰面積計(jì)算，并乘以0.748，折合為氫化可的松的量與游離氫化可的松的量合并計(jì)算。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.404。