檢測(cè)HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法,操作方便,易于普及應(yīng)用,其中抗體檢測(cè)尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的測(cè)定,在HIV感染檢測(cè)中的地位和重要性也日益受到重視。
主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。ELISA用去污劑裂解HIV或感染細(xì)胞液提取物作抗原,IFA用感染細(xì)胞涂片作抗原進(jìn)行抗體檢測(cè),如果發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)重復(fù)一次。為防止假陽(yáng)性,可做Western blotting (WB,蛋白印跡法)進(jìn)一步確證。
WB法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進(jìn)行分離,再經(jīng)傳移電泳將不同蛋白條帶轉(zhuǎn)移于硝酸纖維膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶標(biāo)抗體染色,就能測(cè)出針對(duì)不同結(jié)構(gòu)蛋白抗體,如抗gp120、gp41、P24抗體,特異性較高。
HIV抗體檢測(cè)結(jié)果有兩種可能,HIV陽(yáng)性或HIV陰性。
HIV陰性 | 說(shuō)明從人體內(nèi)檢測(cè)不到HIV抗體,陰性符號(hào)以(-)表示。不能說(shuō)沒(méi)有感染HIV, 要看是什么時(shí)候檢測(cè)的,在窗口期內(nèi),感染者的體內(nèi)還沒(méi)有產(chǎn)生HIV抗體,或還沒(méi)有產(chǎn)生足量的HIV抗體,這時(shí)HIV檢測(cè)是陰性結(jié)果,如果在窗口期之后檢測(cè)的,可以排除感染HIV的可能。 |
HIV陽(yáng)性 | 說(shuō)明從人體內(nèi)檢測(cè)到了HIV抗體,陽(yáng)性符號(hào)以(+)表示。 |
檢測(cè)結(jié)果不定因素 | 感染還處于窗口期:從HIV進(jìn)入體內(nèi)到檢測(cè)這段時(shí)間還不夠長(zhǎng),因此血清還沒(méi)有形成典型的抗體反應(yīng) |
艾滋病進(jìn)展到終末期,抗體水平下降 | |
其他非病毒蛋白抗體的交叉反應(yīng):自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下,身體可以產(chǎn)生一些抗體,其反應(yīng)與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應(yīng)很相似 |
用ELISA檢測(cè)P24抗原,在HIV感染早期尚未出現(xiàn)抗體時(shí),血中就有該抗原存在。由于P24量太少,陽(yáng)性率通常較低?,F(xiàn)有用解離免疫復(fù)合物法或濃縮P24抗原,來(lái)提高敏感性。
用PCR法檢測(cè)HIV基因,具有快速、高效、敏感和特異等優(yōu)點(diǎn),目前該法已被應(yīng)用于HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。