方法名稱：六味地黃丸-沒食子酸測定-高效毛細管電泳法

應用范圍：該方法采用高效毛細管電泳法測定六味地黃丸中沒食子酸的含量。

該方法適用于中成藥六味地黃丸。

方法原理：供試品粉碎后，加95%乙醇浸泡，加熱回流提取，過濾，用高效毛細管電泳儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長271nm處檢測沒食子酸的吸收值，計算其含量。

試劑：1. 硼砂

2. 95%乙醇

3. 沒食子酸對照品（中國藥品生物制品檢定所）

4. 肉桂酸對照品（中國藥品生物制品檢定所）

儀器設備：1 儀器

1.1 高效毛細管電泳儀

1.2 色譜柱

未涂層熔硅彈性石英毛細管內徑75μm；，柱長60cm，有效柱長45cm。

1.3紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1緩沖鹽：20mmol/L硼酸鹽

2.2檢測波長：271nm

2.3 重力進樣（10cm×5S）

2.4運行電壓：20KV

2.5 電泳溫度：20℃

試樣制備：1. 對照品溶液的制備

精密稱取沒食子酸對照品19.5mg于25mL量瓶中，用95%乙醇溶解并稀釋至刻度，作為對照品溶液。精密吸取沒食子酸對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0ml于5ml量瓶中，各加入肉桂酸內標液1ml，95%乙醇溶液定容至刻度。

2. 內標溶液的制備

稱取肉桂酸對照品9.6mg，用95%乙醇溶解并稀釋至25mL，作為內標溶液。

3. 供試品溶液的制備

取六味地黃丸粉碎后，稱取粉末5g，加95%乙醇50mL，浸泡12h,100℃加熱回流提取2h，過濾，濾渣重復提取2次，合并提取液，減壓濃縮至10mL，取該溶液2mL，加入內標溶液1mL,95%乙醇稀釋至5mL，作為供試品。

操作步驟：1. 標準曲線的建立

依法進樣測定，，以沒食子酸對照品峰面積與內標峰面積的比值對其濃度繪制標準曲線，計算線性回歸方程。得Y=-0.016X 0.1333，r=0.9993；線性范圍為15.6～312mg/L。

2. 樣品測定

取供試品溶液，依法進樣測量，記錄各組份峰面積值，計算沒食子酸的含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。