方法名稱： 冰硼散—硼砂的測(cè)定—分光光度法

應(yīng)用范圍： 本方法采用分光光度法測(cè)定冰硼散中硼砂的含量。

本方法適用于中成藥冰硼散。

方法原理： 供試品加甲醇振搖濾過，濾液中加入姜黃素溶液及濃硫酸-冰醋酸溶液，搖勻甲醇定容得供試液。置紫外可見分光光度計(jì),于波長530nm處測(cè)定姜黃素與硼砂在酸性非水介質(zhì)中形成的紅色絡(luò)合物的吸收度，計(jì)算出其含量。

試劑： 1.濃硫酸—冰醋酸 1:1

2.甲醇

3.硼砂

4.姜黃素

儀器設(shè)備： 分光光度計(jì)

試樣制備： 1.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取硼砂適量，加甲醇制成1mg/mL的硼砂對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密量取上述硼砂對(duì)照品儲(chǔ)備溶液40，80，120，160，200µL，分別置于5個(gè)10mL量瓶中，分別加入0.0125%姜黃素溶液0.5mL及濃硫酸-冰醋酸溶液(1:1)6mL，搖勻。以甲醇定容至，放置20min，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3.供試品溶液的制備

精密稱取供試品100mg，加入15mL甲醇搖勻，浸漬2h，不斷振搖。濾過，以甲醇洗滌殘?jiān)?，洗滌液與濾液合并定容至25mL，作為供試品溶液，備用。

4.供試品測(cè)定溶液的制備

精密量取上述供試品溶液50µL，加入0.0125%姜黃素溶液0.5mL及濃硫酸-冰醋酸溶液(1:1)6mL，搖勻,加甲醇定容至10mL，混勻，放置20min，作為供試品測(cè)定溶液。

注1：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一，“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將上述標(biāo)各系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，于波長530nm處測(cè)定吸收度。以硼砂溶液濃度對(duì)吸收度值作線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.供試品的測(cè)定

供試品測(cè)定溶液，于波長530nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算含量。

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測(cè)定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。