方法名稱:
護(hù)肝片-五味子乙素測定-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:
本方法采用高效液相色譜法測定護(hù)肝片中五味子乙素的含量。
本方法適用于中成藥護(hù)肝片。
方法原理:
供試品加正己烷超聲提取,過濾,低溫蒸干,殘?jiān)蛹状级ㄈ荩酶咝б合嗌V儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測五味子乙素的吸收值,計(jì)算其含量。
試劑:
1. 甲醇
2. 五味子乙素對照品(中國藥品生物制品檢定所)
儀器設(shè)備:
1 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱:十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑(ODS柱,5μm,4.6mm×250mm),理論板數(shù)按五味子乙素計(jì)應(yīng)符合規(guī)定。
1.3紫外吸收檢測器
1.4超聲發(fā)生器
2 色譜條件
2.1流動相:甲醇+水=72+28,流速:1.2ml/min
2.2檢測波長:254nm
2.3柱溫:室溫
試樣制備:
1. 對照品溶液的制備
取五味子乙素對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每毫升含0.05mg的溶液,即得。
2. 供試品溶液的制備
取本品20片,除去糖衣,精密稱定,研細(xì),取2.5g,精密稱定,置錐形瓶中,加正己烷適量,超聲提取2次,每次30min,過濾,合并2次濾液,低溫蒸干,殘?jiān)蛹状嘉崾谷芙?,移?5mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
操作步驟:
分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀,紫外吸收檢測器,于254nm處測定五味子乙素的吸收值,計(jì)算出其含量。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。
參考文獻(xiàn):
高宇源,馬梅芳,HPLC快速測定護(hù)肝片中五味子乙素的含量,山東中醫(yī)雜志,2003,22(1):40-42。