為廣譜抑菌劑。通過脂溶性可彌散進入細菌細胞內(nèi)，主要作用于細菌70s核糖體的50s亞基，抑制轉(zhuǎn)肽酶，使肽鏈的增長受阻，抑制了肽鏈的形成，從而阻止蛋白質(zhì)的合成。高濃度時或?qū)Ρ酒犯叨让舾械募毦渤蕷⒕饔谩?/p>

氯霉素一般對革蘭氏陰性菌作用較革蘭氏陽性菌強。敏感菌有腸桿菌科細菌（如大腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、克雷伯氏菌、沙門氏菌等）及炭疽桿菌、肺炎球菌、鏈球菌、李斯特氏菌、葡萄球菌等。衣原體、鉤端螺旋體、立克次體也對本品敏感。本品對厭氧菌如破傷風梭菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、放線菌及乳酸桿菌、梭桿菌等也有相當作用。但對綠膿桿菌、結(jié)核桿菌、病毒、真菌等均無效。

細菌對氯霉素有發(fā)展緩慢的耐藥性，主要產(chǎn)生乙酰轉(zhuǎn)移酶。通過質(zhì)粒傳遞而獲得。某些細菌的一些菌株（綠膿桿菌、變形桿菌、克雷伯菌等）也因改變了細菌胞壁通透性,使氯霉素不能進入菌體而耐藥。